肺鳞癌患者和健康人血清的差异蛋白质组学研究

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangjunfeng_1988
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肺癌是常见的恶性肿瘤之一,全球肺癌发病率和死亡率均居恶性肿瘤的首位。我国肺癌的发病率和死亡率在城市居恶性肿瘤的首位,在农村居第三位。肺癌预后差、死亡率高的主要原因是缺乏有效的早期诊断方法。理论上,分子标志物是肿瘤早期诊断最敏感的指标。因此,寻找敏感性高、特异性好的肺癌血清标志物已成为肺癌早期诊断的关键。 本研究采用二维凝胶电泳与质谱联用(2-DE/MS)以及十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱联用(SDS-PAGE/MS)两条技术路线筛选肺鳞癌患者和健康人的差异血清蛋白质。首先采用2-DE和SDS-PAGE技术分离Ⅰ期肺鳞癌患者和健康人的血清蛋白质,图像分析软件识别差异蛋白质点或差异蛋白质条带,应用电喷雾串联质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)鉴定差异蛋白质,然后应用Western blot和免疫组化方法分别检测差异蛋白质一结合珠蛋白-2(HP-2)在肺鳞癌血清和组织中的表达情况,进一步探讨HP-2的临床应用价值,以及HP-2在肺鳞癌患者血清中升高的原因。 采用2-DE/MS路线识别了10个差异蛋白质点,鉴定了4种差异蛋白质,它们分别是:巨噬细胞表达的凋亡抑制因子、转甲状腺素蛋白相关蛋白、视黄醇结合蛋白和HP-2。采用SDS-PAGE/MS路线识别了5条差异蛋白条带,鉴定了50种蛋白质。Western blot分析结果显示,HP-2在肺鳞癌血清中的表达水平显著高于健康人,但其表达水平与肺鳞癌的临床分期无明显相关性;免疫组化结果显示,HP-2在肺鳞癌组织中的表达水平高于癌旁正常支气管上皮组织。 本文结果提示,HP-2是候选的肺鳞癌血清分子标志物,检测血清中HP-2水平对肺鳞癌诊断可能具有一定的参考价值;肺鳞癌组织中-HP-2表达上调可能是患者血清中HP-2表达升高的原因之一。
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