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目的：探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)信号传导通路及其旁路蛋白激酶Cα(PKC-α)在小鼠肝癌细胞(H22)凋亡过程中的作用及其机制。方法：不同浓度的TNF-α作用于H22细胞后于不同时间流式细胞仪测定细胞的凋亡，westernblot检测细胞内PKC-α、磷酸化-PKC-α(p-PKC-α)、c-Jun N-未端激酶(JNK)、p-JNK、p-P38和caspase-8蛋白的表达。TNF-α作用于H22细胞过程中，分别以sp600125抑制JNK，SB203580抑制P38，G(?)6976抑制或佛波脂(TPA)激活PKC-α活性并检测细胞凋亡和细胞内蛋白的表达，免疫荧光显微镜检测细胞内p-JNK的表达，共聚焦显微镜检测细胞内p-PKC-α的表达及其细胞内移位情况，电泳迁移率变动分析(EMSA)检测细胞内核因子κB(NF-κB)与DNA探针的结合活性，以探讨这些蛋白间的调节作用以及与TNF-α诱导H22细胞凋亡的关系。并以TNF-α联合G(?)6976治疗小鼠肝癌腹水瘤，观察小鼠腹水内肿瘤细胞的坏死及小鼠生存时间。结果：不同浓度的TNF-α作用于H22细胞后，PKC-α、p-PKC-α、JNK、p-JNK、p-P38、caspase-8的表达和细胞凋亡率均随TNF-α浓度升高，作用时间延长而增加。以sp600125抑制JNK或SB203580抑制P38活性，则PKC-α、p-PKC-α表达上调而JNK、p-JNK、p-P38、caspase-8等表达下调，NF-κB与DNA结合活性增加，同时细胞凋亡率下降；免疫荧光显示，p-JNK分布于胞浆胞核且表达下调。以G(?)6976抑制PKC-α活性后，p-JNK，caspase-8表达上调，NF-κB结合活性减弱，细胞对TNF-α敏感性增加。相反，如同时TPA激活PKC-α，则p-JNK，caspase-8表达下调，共聚焦下p-PKC-α表达显著增强，分布于胞浆胞核，NF-κB与DNA探针结合活性显著增加。TNF-α联合G(?)6976治疗小鼠肝癌腹水瘤，腹水内坏死肿瘤细胞较TNF-α治疗组和对照组均显著增加，小鼠生存时间也明显延长。结论：TNF-α作用于H22细胞的信号传导过程中，TNF-α可显著上调JNK、p-JNK、PKC-α、p-PKC-α、p-P38、及caspase-8的表达和NF-κB与DNA探针的结合活性；JNK，P38表达与活化促进细胞凋亡，而PKC-α，NF-κB的表达与活化抑制细胞凋亡。PKC-α抗凋亡作用是通过增加NF-κB活性来实现的，PKC-α抑制剂G(?)6976，可以显著提高，TNF-α对H22细胞的细胞毒性，TNF-α联合G(?)6976治疗小鼠肝癌腹水瘤可以显著延长小鼠的生存时。