沙葱黄酮对肉羊机体抗氧化和免疫功能的影响及其机理研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 33次 | 上传用户:jazz988
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沙葱是北方荒漠草原的代表性葱属植物,其营养成分丰富且生物活性独特。通过课题组前期研究发现,黄酮类物质是沙葱重要的天然活性成分之一;体外研究也证明沙葱黄酮类化合物具有抗氧化、免疫增强、免疫调节、优化瘤胃发酵等诸多功能。为了进一步阐明沙葱黄酮对肉羊体内抗氧化、免疫功能及其机理,本论文选用75只6月龄左右、体重相近(39.9±3.2 kg)的小尾寒羊为动物模型,随机分为5组(采用蛇形分组),即空白对照组、沙葱对照组和3个试验组,每个组15只羊。空白对照组饲喂基础日粮,沙葱对照组饲喂基础日粮中添加20g/d沙葱粉,3个试验组则基础日粮中分别添加11mg/kg、22mg/kg、33mg/kg的沙葱黄酮(采用逐步混匀的方法)。试验期持续75d,其中前15d为预饲期,后60d为正式试验期。正式试验期的第0d、15d、30d、45d、60d,分别对试验羊进行颈静脉采血并分离血清,进行下一步试验。试验结束后,每组随机屠宰3只羊并分离肝脏、脾脏组织,用于测定组织抗氧化指标。研究结果如下:(1)肉羊日粮中添加11 mg/kg-33 mg/kg沙葱黄酮可显著提高血清及肝脏T-AOC含量(P<0.05),而对脾脏的T-AOC含量无显著影响(P>0.05),并且饲喂45d后其效果最为明显。除空白对照组外,其它各组均能提高血清、肝脏和脾脏T-SOD活力;血清CAT活力;血清、脾脏GSH-PX活力,其中试验3组的促进作用高于其它各组,并饲喂30d后达到显著水平(P<0.05)。对照组和各试验组之间的肝脏、脾脏CAT活力以及肝脏GSH-PX活力均无显著差异(P>0.05)。沙葱黄酮可显著降低血清及肝脏的MDA含量(P<0.05),但对脾脏MDA含量无显著影响(P>0.05)。因此,日粮添加沙葱黄酮可显著影响肉羊抗氧化指标,且日粮添加11 mg/kg-33 mg/kg沙葱黄酮均可对肉羊体内起到抗氧化作用,并对时间有一定的依赖性,饲喂30d后沙葱黄酮开始发挥其体内抗氧化作用。(2)肉羊日粮添加11 mg/kg-33 mg/kg沙葱黄酮能显著提高其ACP、LZM、NO等非特异性免疫指标(P<0.05),并且随着试验期的延长其作用逐渐增强,到45d时达到显著水平(P<0.05)。沙葱对照组及3个试验组均显著提高体液免疫指标IgG含量(P<0.05)。从试验期30d后,沙葱对照组及3个试验组对细胞因子IL-1p、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-y含量有显著上调作用(P<0.05),沙葱黄酮也能上调CD4+、CD4+/CD8+细胞及细胞比值,同时下调CD8+细胞数量。沙葱黄酮对肉羊神经内分泌激素ACTH、GH、IGF-1均有一定的上调作用,对CORT有一定的抑制作用;尤其是对肉羊血清生长激素(GH)、类胰岛素样生长因子-I(IGF-I)含量有显著提高的作用(P<0.05),并具有时间依赖性。与其它各组相比,肉羊日粮添加22mg/kg沙葱黄酮可显著降低血清皮质酮(CORT)含量(P<0.05);日粮添加沙葱黄酮对血清促肾上腺皮质激素(ACTH)含量有提高趋势,但各试验组间无显著差异(P>0.05)。所以,日粮添加11 mg/kg~33 mg/kg沙葱黄酮对肉羊免疫功能具有重要的调节作用,该效果还具有一定的时间依赖性。(3)通过细胞、分子及蛋白水平进行相关机理的研究结果显示,肉羊日粮添加11 mg/kg-33 mg/kg沙葱黄酮对其免疫相关基因及蛋白有良好的调节作用,其中日粮添加33mg/kg沙葱黄酮对肉羊淋巴细胞转化率及细胞凋亡有显著的提高作用(P<0.05),并上调IL-1p、IL-4、IL-6、TNF-α、IL-2、IFN-γ、STATl基因mRNA的表达水平;添加22mg/kg沙葱黄酮对IL-1p、IL-6、TNF-α IFN-γ STAT1蛋白有上调作用。(4)根据沙葱黄酮对免疫功能的作用,对每组免疫功能最强和最弱的两只羊进行配对,通过高通量测序差异表达基因后发现了11个与机体免疫应答、代谢调控等机制相关的基因。其中ALAS2所编码的蛋白质在催化血红素生物合成途径;肿瘤相关的基因IFIT1、IFIT2、 IFIT3;参与脂肪细胞发育和代谢基因STEAP4;免疫相关基因PTX3;参与先天免疫应答蛋白OAS1。
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