周围神经组织工程研究雪旺细胞和PLA材料复合种植的体内外实验研究

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周围神经(Peripheral Nerve,PN)缺损的修复一直是临床的一大难题,临床常用的方法以自体神经移植效果较为肯定,目前尚未有任何移植材料能取代自体神经移植。但自体神经移植由于来源的限制、遗留供区感觉减退等问题,在临床应用中受到制约。寻找一种理想的神经移植替代物一直是实验研究的重点。近年来随着组织工程的发展,对周围神经研究工作的进一步开展,使我们能从组织工程的角度考虑周围神经损伤的修复。 目的:本实验采用新生鼠的雪旺细胞(Schwann Cell,SC)作为PN组织工程的种子细胞,在体外种植于高分子聚合材料聚乳酸(PolylacticAcid,PLA)膜片上,并将SC种植在PLA导管中,桥接大鼠坐骨神经缺损,了解SC在PLA材料上的生长情况、活性SC能否在PLA导管中存活、生长,探讨组织工程化人工神经修复PN缺损的可能性,为将来临床应用提供实验依据。 方法:1.体外培养:10只成年SD大鼠,40只新生SD大鼠。取新生鼠坐骨神经及臂丛神经,制成浓度为10~6个/mm~3的SC悬液,分别种植于PLA膜片、96孔培养板及20ml培养瓶中。培养1、3、5、7、14天后,相差显微镜下观察SC的生长情况及其形态,扫描电镜下观察SCl 在 PLA膜片上的生长、融合情况。培养瓶中细胞培养 3天后,按 108个l/mln’的细胞浓度种植于 PLA导管中,继续培养 24小时后,桥接成年大l 鼠坐骨神经缺损。术后4、8、12周,于中段切取套接的神经移植体,l 作光镜、电镜切片,观察 SC在 PLA导管中生长情况、再生轴突髓鞘化l 形成情况、SC与再生神经的关系。l 结果:1SC能在 PLA膜片上正常生长。2SC能于体内在 PLA导管J 生长、再生轴突髓鞘化。3.体内实验时意外发现在再生的神经纤维中出D 现横纹肌组织。l 结论:1*C和PLA膜片的相容性良好。2石C种植在PLA导管后,ISC 能在导管中存活、生长,引导神经再生。3*C可作为一个种于细胞l 在 pN i织工程中应用,{日是需要作讲一步的研究。
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