长链非编码RNA MALAT-1在肝癌肝移植术后肿瘤复发预测中的价值研究

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背景:长链非编码RN (lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,不编码蛋白质,而是以RNA的形式在表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等方面调控基因的表达。近来研究发现lncRNAs在肿瘤的发生发展中发挥的重要作用,成为肿瘤研究中一个全新的热点,对lncRNA功能的深入研究将使目前对肿瘤发生发展调控网络的认识带来革命性的变化。MALAT-1是一种分布于哺乳动物细胞核内的lncRNA,其表达异常与多种人类实体肿瘤的发生发展相关,包括肺癌、乳腺癌、大肠癌和肝癌,并与某些肿瘤转移潜能及术后复发有关。其在肝癌中的作用有待于进一步阐明。目的:探讨lncRNA MALAT-1在肝癌中的表达及其在肝癌移植后肿瘤复发预测中的潜在价值,并了解其在肝癌细胞生物学行为调控中的作用。方法:采用实时定量逆转录PCR方法(qRT-PCR)检测MALAT-1在11株肿瘤细胞株中和112例肝癌组织中的表达水平。分析MALAT-1表达高低与肝癌移植后3年无瘤生存期的关系。同时,体外功能研究用siRNA沉默肝癌细胞中MALAT1的表达,研究其对肝癌细胞增殖,凋亡以及移动性和侵袭性等肿瘤恶性特征的影响。结果:11株肝癌细胞株中lncRNA MALAT-1的表达均高于正常肝细胞株,其中4株上调2倍以上。配对的52例组织标本中,有38例(73.1%)MALAT1在HCC中表达较癌旁组织升高(P<0.001)。在连续的60例HCC接受肝移植的组织样品中,分析了MALAT-1基因表达与临床病理参数的关系后发现MALAT1的表达水平与术前血清中AFP水平(P=0.03)和肿瘤数目(P=0.028)成正相关。另外,术后肿瘤复发患者中MALAT-1高表达为65.7%(23/35),而无复发者中MALAT-1高表达为20%(10/25),lncRNA MALAT-1过表达与肝癌肝移植术后肿瘤复发显著相关(P=0.013)。两者的3年无瘤生存率分别为30.3%和55.6%(P=0.01),显著低于后者。Cox回归模型多因素分析结果显示MALAT-1在HCC组织中的过表达是肝癌移植术后肿瘤复发的独立危险因素(危险系数:3.280;95%可信区间:1.156-7.094;P=0.003)。体外功能研究显示siRNA沉默MALAT-1表达下调后,肝癌细胞hepG2的增殖受到一定的抑制;受凋亡刺激物星形孢子素(STS),顺铂(CDDP),阿霉素(DOX),肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的凋亡增加;并且显著抑制细胞的迁移能力和侵袭能力。结论:长链非编码基因MALAT-1过表达在HCC中广泛存在,并在肝癌细胞的增殖,凋亡,迁移能力和侵袭力等恶性生物学行为发挥着重要的作用。MALAT-1的过表达是预测肝癌肝移植后肿瘤复发的一个独立危险因素,并可以作为潜在的分子治疗靶点。
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