乌梁素海萘降解细菌的分离、鉴定与降解特性的研究

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多环芳烃(Polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)是一类在环境中常见的持久性污染物,具有致癌、致畸、致突变的特性,其种类多、分子结构稳定,可通过生物链积累,最终对人类健康造成危害,已经受到了人们的广泛关注。在PAHs的各种消除方法中,利用自然界广泛存在的微生物对PAHs污染环境进行修复,具有经济、操作简单、无二次污染等其他方法不可替代的优势。因此,PAHs的生物降解研究工作具有重要的现实意义。本研究从内蒙古地区富营养化严重的乌梁素海选取水样,以萘为唯一碳源,通过普通分离和富集驯化两种方法进行萘降解菌株的筛选,并对筛选出的菌株开展降解特性研究,结果和结论如下:1.两种方法共筛选得到34个菌株,16Sr DNA序列分析表明,这些菌株分属于放线菌门(Actinobacteria)占全部菌株的68%、变形菌门(Proteobacteria)占总菌株数的18%、硬壁菌门(Firmicutes)占菌株总数的12%,以及拟杆菌门(Bacteroidetes)占总数的2%。经过复筛,得到了8个萘降解菌,其中有6个是放线菌门(Actinobacteria)的菌株,分别为S2Microbacterium testaceum, S8Microbacterium flavescens, S14Rhodococcus rhodochrous, C4Dietzia cercidiphylli, C6Microbacterium oxydans, C9Dietzia natronolimnaea;另外2个菌株属于变形菌门(Proteobacteria),分别为:S4Brevundimonas diminuta, C8Pseudomonas stutzeri;2.菌株S2、C8、S8和C4的10天萘降解率分别为100%、81%、86%和91%,高于很多目前已报道的菌株,属于高效降解菌范畴,而另外4个菌株S4、S14、C6和C9的降解效率偏低;3.除菌株S4在硝态氮氮源中降解率较铵态氮氮源中降低了近25%以外,其余7个菌株的降解率均在硝态氮氮源中有所增加,增幅最小为C8,增加了3%,增幅最大的为S14,增加了24%。该结果说明培养基中经常使用的铵态氮应该考虑替换成硝态氮,多数情况下或可促进细菌对萘的降解;4.微量元素(TES)对菌株降解率影响的研究结果表明,菌株S2、S8在添加TES1和TES2后降解率均有所降低,添加TES对菌株S4、S14、C4、C6、C8和C9对萘的降解有促进作用,降解率增加范围为3%-26%,但是当TES浓度过高时,可能会对菌株C4、C6、C8和C9产生重金属抑制作用。该结果说明,TES对降解效率的影响变化较大,具体影响和变化程度因菌种不同而不同;5.维生素对菌株降解率的影响结果表明,培养基中添加维生素混合液后,菌株C4、C8降解率无明显影响,但是对其余6个菌株萘的降解均有不同程度的促进作用,其中S14的促进作用最为明显,其降解率增加了23%,其次是C6,增加了16%,其余4个菌株的增幅在10%左右。由此得知尽管维生素对菌株的作用效果并不完全一致,但整体上维生素对多数菌株的生长以及萘的降解均有很好的促进作用。此结果说明,在细菌降解萘的研究中,维生素可直接加入而无需担心其会产生较强的抑制作用;6.除菌株C8的降解率无明显变化外,其余7个菌株在最适pH值中的降解率较环境原位pH中均有所增加,其中S8、S14的增幅较小,增加了5%,菌株S2、S4和C9降解效率都增加了12%左右;菌株C6、C4增加显著,分别增加了22%和26%。菌株的降解率增幅不同可能与最适pH与环境原位pH的差距大小,以及菌株对环境的适应能力有关。
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