目的:脂肪间充质干细胞因取材简易,获得量大,细胞干性高等特点,近年来成为组织过程种子细胞的焦点,本实验将TGF-β3作为目的基因转载脂肪间充质干细胞,待形成富软骨细胞外基质后,脱去细胞仅留软骨细胞外基质支架材料,检测富ECM-PCL-HA支架材料理化性能,为组织工程支架材料提供更优选择。方法:(1)体外分离培养兔脂肪间充质干细胞,并且进行多向诱导分化及鉴定;(2)慢病毒介导TGF-β3转染兔脂肪间充质干细胞;(3)流式细胞术及激光共聚焦检测转染效率;(4)结合CCK-8检测不同滴度慢病毒感染ADSCs细胞毒性;(5)通过实时定量PCR检测、免疫印迹检测软骨相关基因及蛋白的表达;(6)3D打印支架材料,制备富软骨细胞外基质支架材料;(7)富软骨细胞外基质支架材料的理化性能检测。结果:脂肪组织中细胞丰富,取材方便,ADSCs干细胞特性显著,成脂、成骨、成软骨向分化时间较短,能力强。通过实时定量PCR检测结果显示:慢病毒转染TGF-β3的脂肪间充质干细胞诱导7天、14天、21天合成的Aggrecan、SOX-9及COL2基因水平明显高于空白组(P<0.01),诱导21天的Aggrecan、SOX-9及COL2基因水平明显高于诱导7天、14天(P<0.05),且病毒转染滴度越高,合成的Aggrecan、SOX-9及COL2越多,以形成更多的细胞外基质,构建一个良好的成软骨分化的微环境。将转染后ADSCs接种PCL-HA支架上,2周后洗脱细胞,仅存留ECM,构建复合材料ECM-PCL-HA。检测其溶胀率及孔隙率均较PCL-HA高(P<0.05)。结论:复合支架ECM-PCL-HA理化性能高于单纯高分子支架材料,符合软骨组织工程的要求,为软骨组织工程体内修复关节软骨缺损的临床应用提供了实验依据。