藏药黑果枸杞对运动疲劳所致氧化应激的影响

来源 :甘肃中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:chunling329
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目的:通过建立小鼠运动疲劳模型,探讨藏药黑果枸杞对小鼠运动疲劳所致氧化应激的影响,并通过建立3种体外自由基发生体系和3种肝微粒体脂质过氧化损伤模型,探讨藏药黑果枸杞对自由基的清除作用和对脂质过氧化损伤的保护作用,为藏药黑果枸杞的进一步开发利用提供理论依据。方法:1.150只小鼠随机分为3组,每组50只,分别是:泳前组、泳后即刻组和泳后恢复组(泳后恢复30 min);每组再分为5小组,每组10只,分别是:藏药黑果枸杞低剂量组(3 mg/g),藏药黑果枸杞中剂量组(6 mg/g),藏药黑果枸杞高剂量组(12 mg/g),阳性组(红牛0.02 ml/g),和空白组(蒸馏水0.02 ml/g),连续灌胃给药30 d后,于末次给药1 h后,在(25±2)℃水中游泳40 min造成运动疲劳,取血清,比较小鼠泳前、泳后即刻和泳后恢复30 min后血清中MDA、LPO、ROS含量及SOD、CAT、GSH-Px活性。2.采用试剂盒建立体外OH-、O2-和DPPH自由基发生体系,取藏药黑果枸杞储备液用生理盐水配成不同浓度工作液(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 g生药/mL),评价不同浓度黑枸杞水煎液对OH-、O2-、DPPH自由基的清除能力。3.取健康大鼠肝脏,制备肝微粒体悬液,用三种不同方法(包括CHP、Vc/Fe2+和CCl4/NADP)诱导建立脂质过氧化损伤模型,检测不同浓度的藏药黑果枸杞水煎液(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2g生药/mL),对肝微粒体脂质过氧化损伤模型中生成的丙二醛(MDA)含量的影响及其剂量效应关系。结果:1.在泳前组中,各实验组和对照组小鼠血清中MDA、LPO、ROS含量及SOD、CAT、GSH-Px活性均无明显差异(p>0.05)。疲劳游泳后,空白组小鼠血清中MDA、LPO、ROS含量明显增高(p<0.05),SOD、CAT、GSH-Px活性明显降低(p<0.05)。藏药黑果枸杞水煎液各浓度组均可以降低泳后即刻组及泳后恢复组小鼠血清中MDA、LPO、ROS含量,增加SOD、CAT、GSH-Px活性,其中中、高剂量藏药黑果枸杞组效果明显,与空白组比较,差异具有统计学意义(p<0.05),且高剂量组效果更佳(p<0.05)。2.在三种自由基发生体系中,不同浓度的黑枸杞水煎液都对O2-、OH-、DPPH自由基都具有一定的清除能力,随着浓度增加,清除能力增强。根据ELISACalc软件四参数拟合计算出黑枸杞水煎液对超氧阴离子的半数清除浓度(IC50)为1.18132 g/mL;对羟自由基的半数清除浓度(IC50)为0.94722 g/mL;对DPPH的半数清除浓度(IC50)为1.01458 g/mL。3.在三种脂质过氧化损伤模型中,浓度0.6-1.2 g/mL的藏药黑果枸杞水煎液对肝微粒体脂质过氧化损伤都有一定的抑制作用(p<0.05),且作用有一定的量效关系。在VC/Fe2+激发模型中,浓度1.2 mg/mL的藏药黑果枸杞水煎液对MDA生成的抑制率达到了65%;在CHP激发模型和CCl4/NADP激发模型中,浓度1.2 mg/mL的藏药黑果枸杞水煎液MDA生成的抑制率都达到了50%左右。结论:1.藏药黑果枸杞可明显缓解运动疲劳所引起的氧化应激反应,其作用可能通过减少运动疲劳小鼠血清中MDA、LPO、ROS含量及增加SOD、CAT、GSH-Px活性来实现。2.藏药黑果枸杞可能是通过清除氧化应激产生的自由基,如O2-、OH-、DPPH,进而增加机体抗氧化能力来缓解运动疲劳所致的氧化应激损伤。3.藏药黑果枸杞水煎液对肝微粒体脂质过氧化损伤具有一定的缓解作用,且作用呈剂量依赖性。
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