【摘 要】
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该室的前期工作已分别对E6的P53降解活性位点和E7的pRB结合位点进行了定点诱变,并以改造后的基因构建了复制型重组痘苗病毒实验株.该实验株病毒能有效地诱导小鼠产生特异性的
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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该室的前期工作已分别对E6的P53降解活性位点和E7的pRB结合位点进行了定点诱变,并以改造后的基因构建了复制型重组痘苗病毒实验株.该实验株病毒能有效地诱导小鼠产生特异性的CTL,并能保护小鼠免受E6和E7基因转化的TC-1肿瘤细胞的攻击.为获得更为安全的人用疫苗株,该文以非复制型重组痘苗病毒为载体,构建了表达HPV16突变型E6和E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒,并对其免疫效果进行了研究.该文在原E7基因pRB结合位点突变的基础上,采用PCR定点诱变技术将位于Mi2β结合位点的第67位密码子Leu突变为Arg,获得了E7基因的一个新突变体mE7-3(24g26G67R).为检测E6和E7基因改造后转化活性是否已被去除,分别将野生型E6和E7基因及其各种突变体插入逆转录病毒表达载体pLXSN中,转染Balb/c3T3细胞,观察对Balb/c3T3细胞的转化作用.非复制型重组痘苗病毒NTVJmE6E7对小鼠的免疫效果与复制型重组痘苗病毒RVmE6E7Lac基本相近.由于其具有低毒等优点,更适用于人体接种.NTVJmE6E7可作为HPV16相关肿瘤及其癌及其癌前病变的免疫治疗的候选疫苗,尤其对于肿瘤扩后杀伤残余的和已转移的肿瘤细胞,防止肿瘤的复发和转移,具有一定的应用价值.
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