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目的:气道重塑与气道炎症反应导致的气道壁反复损伤与修复密切相关,“气虚、痰浊、血瘀”为COPD气道重塑的重要病因病机,其中气虚贯穿COPD发生发展全过程,本实验选用云南省名中医李庆生教授的临床验方“玉屏风散加味方”,观察气道炎症微环境相关因子的变化,以期探讨该方改善COPD炎症微环境、延缓气道重塑进程的作用。方法:1.分组:SPF级Wistar大鼠,体重180~220g,雄性,分为正常对照组,模型组,阳性药物组,全方低、中、高剂量组,玉屏风散低、中、高剂量组,益气药对低、中、高剂量组。模拟临床疾病发展进程设置:预防给药组、成模给药组、成模后4周给药组、成模后8周给药组,预防给药组不设阳性药物组;2.复制模型:通过气管内两次注入脂多糖(LPS)叠加被动烟熏的方法复制COPD大鼠模型,造模时间为8周;3.指标观察:观察大鼠行为学变化及肺组织病理改变;应用酶联免疫吸附法,检测sIgA、SC、TNF-ɑ、IL-8表达;应用16S rDNA对可变区(V3,V4,V5)进行测序,并借助Illumina MiSeq测序平台分析大鼠气道微生物群的结构和丰度。结果:1.肺组织病理切片HE染色结果:中药干预组:大鼠肺内细支气管上皮增生、管腔狭窄、管壁增厚、管壁及肺间质周围炎性细胞浸润等均较模型组有不同程度改善,改善效果以成模后4周给药组全方组效果较好。2.大鼠siga、plgr/sc、tnf-ɑ、il-8表达水平变化:(1)预防给药组:模型组大鼠siga、il-8表达水平降低,sc、tnf-ɑ表达水平升高;中药干预组:除玉屏风散中外,其余中药干预组大鼠siga表达水平升高,以益气药对中升高最为明显;全方高中低、玉屏风散高中低、益气药对高大鼠sc表达水平降低,益气药对中低大鼠sc表达水平升高,以益气药对低升高最为明显;全方中、益气药对高中低大鼠tnf-ɑ表达水平下降,全方高低、玉屏风散高中低大鼠tnf-ɑ表达水平升高,以益气药对中降低最为明显;各中药干预组大鼠il-8表达水平下降,以玉屏风散低降低最为明显。(2)成模给药组:各组大鼠siga、sc、tnf-ɑ表达水平变化不明显;模型组大鼠il-8表达水平降低,各中药干预组大鼠il-8表达水平下降,以玉屏风散中降低最为明显。(3)成模后4周给药组:模型组大鼠siga、il-8表达水平降低,sc、tnf-ɑ表达水平升高。中药干预组:全方低、玉屏风散中、益气药对高中低大鼠siga表达水平升高,全方高中、玉屏风散高低大鼠siga表达水平降低,以玉屏风散中升高最为明显;全方中低、玉屏风散高中低、益气药对高中低大鼠sc表达水平降低,全方高大鼠sc表达水平升高;除全方高、益气药对中外,其余中药干预组大鼠tnf-ɑ表达水平降低,以全方中降低最为明显;各中药干预组大鼠il-8表达水平降低,以玉屏风散高降低最为明显。(4)成模后8周给药组:模型组大鼠siga、il-8表达水平降低,sc、tnf-ɑ表达水平升高。中药干预组:大鼠siga表达水平升高,以益气药对中升高最为明显;大鼠sc表达水平升高,以益气药对中升高最为明显;大鼠TNF-ɑ表达水平降低,以玉屏风散中降低最为明显;大鼠IL-8表达水平降低,以益气药对中降低最为明显。3.气道菌群组成及变化:(1)预防给药组:模型组Proteobacteria(变形菌门)、Firmicutes(厚壁菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)含量均降低,中药干预后含量仍降低;模型组Pseudomonas(假单胞菌属)、Sphingobium(鞘氨醇单胞菌属)、Rhizobium(根瘤菌属)、Acinetobacter(不动杆菌属)含量均降低,中药干预后含量仍降低;(2)成模后4周给药组:模型组Proteobacteria(变形菌门)含量增加,Firmicutes(厚壁菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)含量均降低,中药干预后Proteobacteria(变形菌门)含量降低,玉屏风散高Firmicutes(厚壁菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)含量增高;模型组Pseudomonas(假单胞菌属)、Rhizobium(根瘤菌属)、Acinetobacter(不动杆菌属)含量增高,Sphingobium(鞘氨醇单胞菌属)含量降低,中药干预后Pseudomonas(假单胞菌属)、Rhizobium(根瘤菌属)、Acinetobacter(不动杆菌属)含量降低,Sphingobium(鞘氨醇单胞菌属)全方高含量增高,玉屏风散高降低,提示玉屏风散加味方可调节气道菌群中变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、假单胞菌属、鞘氨醇单胞菌属、根瘤菌属、不动杆菌属含量。结论:1.玉屏风散加味方能通过干预sIgA、plgR/SC、TNF-ɑ、IL-8的表达,减缓气道炎症的发生发展;2.玉屏风散加味方能调节气道菌群结构和丰度,降低气道炎症水平;3.玉屏风散加味方对气道炎症微环境的调节可能是延缓COPD气道重塑病变进程的作用机制之一。