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早开堇菜(Viola prionantha Bunge)是堇菜科堇菜属的优良野生地被草本,观赏价值极高,但目前在园林上还没有被开发利用。本文以早开堇菜幼嫩的叶片、叶柄和子叶节为外植体进行组织培养,建立了早开堇菜的再生体系。该体系丰富了早开堇菜的繁殖方式,为其大规模应用于城市园林地被绿化提供了技术保证,以充分发挥早开堇菜的园林观赏价值。论文的主要研究结果如下:1、早开堇菜外植体最佳灭菌方式:(1)子叶节最佳消毒方式是70%乙醇消毒15s,0.1%升汞消毒5-7min。(2)叶片和叶柄最佳消毒方式是70%乙醇消毒30s、0.1%升汞消毒 8min。2、初代培养:在光照培养条件下,早开堇菜子叶节诱导定芽和叶柄诱导不定芽的最适培养基为MS+6-BA2.Omg·L-1+NAA0.1mg·L-1;子叶节的诱导率为98.3%,出芽指数为5.36,叶柄的诱导率为83.3%,出芽指数为4.18。叶片不适合作为直接诱导不定芽的外植体。三种外植体(子叶节、叶片、叶柄)均能诱导产生愈伤组织,子叶节诱导产生愈伤组织所需时间最短,其次为叶柄,叶片次之。子叶节、叶柄、叶片诱导愈伤组织的最适植物生长调节剂组合均为MS+6-BA 1.0 mg·L-1 +2,4-D 0.5 mg·L-1,其愈伤组织诱导率分别为98.3%、96.7%、88.3%。3、继代培养:早开堇菜定芽和不定芽继代增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA0.075mg·L-1,增殖倍数为6.70;早开堇菜子叶节、叶片、叶柄的愈伤组织增殖培养的最适植物生长调节剂组合为MS + 6-BA 1.0 mg·L-1+ 2,4-D 0.75mg·L-1,愈伤组织生长健康,早开堇菜愈伤组织的增殖倍数可达4.97,其中愈伤组织类型对愈伤组织增值倍数的影响不显著。4、早开堇菜愈伤组织分化的最优组合是MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,分化率达100%,平均不定芽数为8.03。5、壮苗的培养:在不添加任何植物生长调节剂的MS培养基中植株生长健康。6、生根诱导培养:最适合早开堇菜再生有效苗生根的培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg·L-1,生根效果较好,植株生长健壮,生根率最高,达93.38%,平均生根数最多,为5.39条,平均根长为4.8cm。7、炼苗与移栽,早开堇菜最适炼苗基质为珍珠岩:河沙:腐殖质=1:2:2,植株成活率最高,达100%,且植物长势良好。