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白喉乌头为毛莨科乌头属的多年生草本植物,其干根可以用于治疗躯体四肢的麻痹、关节红肿疼痛、风湿冷痛、痢疾等疾病。乌头碱是白喉乌头根和附子的主要次生代谢产物,具有良好的抗炎、抗肿瘤、镇痛等作用。研究表明,植物内生真菌可产生与宿主植物次生代谢产物相同或相似的活性成分,因此白喉乌头内生真菌可以作为筛选新药物的潜在资源。本文采用组织分离法从伊犁昭苏县野生白喉乌头根中分离得到了70株形态特征有差异的内生真菌,通过纸片扩散法测定分离菌株发酵液对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念球菌的抑菌作用。结果显示,20株内生真菌有不同水平的抑菌活性,其中菌株3株内生真菌对4种指示菌有较强的抑菌活性,1株真菌对3种指示菌有较强抑菌活性,2株内生真菌对3种指示菌有中等水平的抑菌活性,4株内生真菌对2种指示菌有中等水平的抑菌活性,10株内生真菌只对1种指示菌有中等水平的抑菌活性。本试验结果表明,5株白喉乌头内生真菌具有较强的抑菌活性,其中菌株YLAC-3、YLAC-20和YLAC-69的抑菌活性较广谱。为了确定内生真菌的分类学地位,首先用光学显微镜对20株具有抑菌活性内生真菌的菌落、菌丝体和分生孢子进行形态特征观察,然后用PCR从内生真菌基因组DNA中扩增出rRNA基因的ITS片段,并用Clastal X8.1和Mega 3.0软件构建ITS序列的系统发育树。鉴定结果表明,3株菌为曲霉属菌种,5株菌为担子菌亚门,6株菌为短梗霉属,1株菌为Simplicillium lanosoniveum,1株菌为Coprinellus domesticus,1株菌为青霉属菌种。采用薄层层析法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)检测真菌发酵液和菌丝体提取液中的乌头碱。在20株抑菌活性内生真菌中只有1株塔宾曲霉YLAC-3能产乌头碱,即在菌株YLAC-3发酵液和菌丝体提取液中均出现与乌头碱标准品相似的吸收峰。结论:从白喉乌头根部分离得到20株具有抑菌活性的内生真菌,它们发酵液对指示菌显示较强的抑菌活性,并证实白喉乌头内生真菌是寻找新型抗菌抗癌活性物质的新资源。