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目的:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是以甘油三酯在肝内过度贮积而引起的临床病理综合征,其范畴包括单纯性脂肪肝(NASFL)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和NASH相关性肝硬化。然而,NAFLD发病机制尚不明确,临床上仍缺乏有效的治疗手段。目前认为其属于代谢综合征的范畴,胰岛素抵抗及炎症因子的参与是其发病的重要环节。本实验采用高脂胆固醇饮食建立非酒精性脂肪肝大鼠模型,动态观察大鼠肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达情况,对过氧化物酶体增殖物激活受体γ在NASH发病机理中的作用进行初步探讨,同时观察降脂益肝冲剂对肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA表达的影响,探讨其可能的分子治疗机制,为其更广泛的临床应用提供实验依据。方法:1.动物模型的建立及标本的采集:70只雄性Wistar大鼠正常喂养一周后,随机分为正常对照组(N组):给予正常饲料;模型对照组(M组),药物治疗组(D组):给予高脂饲料(85%普通饲料,13%的猪油和2%的胆固醇),设4、8、12周三个时相点,相对应的组别为N1、N2、N3,M1、M2、M3,D组,每组10只。D组于实验第8周末给予降脂益肝冲剂1ml/100g,以0.8g/ ml的浓度溶解灌胃,每日两次,持续4周。同时M组和N组分别给予等量的生活饮用水灌胃。分阶段处死各组大鼠,自腹主动脉采血,迅速取出肝脏,按常规制备血清以及肝组织切片,并留取少量肝组织于-70℃低温保存。2.检测指标:全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、血脂,葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FBG),铜染色法测定血清游离脂肪酸(FFA),放免法测定血清空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素敏感指数(ISI=1/FBG×FINS);光镜下评估脂肪变性和炎症活动情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达。结果:1.正常组大鼠肝小叶结构完整,肝索围绕中央静脉呈放射状分布,细胞呈多边形,大小较一致;各项生化指标均在正常范围,可见过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA表达。2. 4周末,模型组大鼠出现脂质代谢紊乱,伴随有轻度高胰岛素血症和胰岛素抵抗;血清转氨酶水平较正常组升高;肝组织出现了轻度脂肪变,无炎细胞浸润;肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达较其对照组降低(P<0.01)。3. 8周末,模型组大鼠出现了明显的脂质代谢紊乱,伴随明显高胰岛素血症和胰岛素抵抗;血清转氨酶水平较正常组升高;肝组织出现了轻到中度脂肪变,且无炎细胞浸润;肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达较其对照组显著降低(P<0.01)。4. 12周末,模型组大鼠和正常组相比,血脂和肝脏转氨酶水平明显升高;肝组织出现中到重度脂肪变,肝小叶内炎细胞浸润和散在的点状坏死,炎症活动度计分明显高于正常组(P<0.01);肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA表达显著降低,且与前期相比差异显著(P<0.01)。用药组大鼠血清各项指标均明显改善;肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA表达有所升高(P<0.01);肝组织脂变程度及炎症活动度明显减轻(P<0.05)。结论:1.高脂高胆固醇饮食可以成功复制NAFLD大鼠模型;胰岛素抵抗、脂质代谢紊乱与NAFLD的发生密切相关。2.正常大鼠肝脏可表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ,NASH大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因表达下调,且随造模时间延长表达量显著减少。3.降脂益肝冲剂对NASH具有良好的治疗效果,其部分作用的发挥可能与上调肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达有关。