新城疫（Newcastle Disease，ND）是一种由新城疫病毒（Newcastledisease virus，NDV）引起的具有高度传染性的病毒性传染病，能感染鸡、鸽、鸭和野生鹦鹉等多种鸟类，往往给养禽业造成极大的危害。目前用于防制该病的疫苗为传统的常规疫苗，其研制都是以大量培养病原微生物为基础的，这不仅给疫苗的制造带来局限性，同时存在潜在的不安全因素，如病原微生物灭活不彻底，导致强毒散播；致弱的疫苗存在毒力返强问题等。自70年代发展起来的分子生物学技术为解决传统疫苗的缺陷、研制高效优质的新型疫苗带来了希望。 随着分子生物学的快速发展，以分子操作为基础的基因工程疫苗研究方兴未艾，由于基因工程疫苗具有原料来源简单、安全性高、便于区分感染动物和免疫动物、易于制作多价疫苗等优点，使基因工程疫苗具有巨大的发展潜力和市场前景。 脂质体可将蛋白质抗原以细胞膜抗原的形式提呈给宿主免疫系统，既可诱发体液免疫，又可诱导细胞免疫，并且对所包被的物质具有缓释作用，为近十几年发展起来的新型抗原载体。 本课题将鸡新城疫病毒的重要保护抗原基因-血凝素-神经氨酸苷酶基因克隆到杆状病毒表达载体，并使其在昆虫细胞得到成功表达，利用表达的蛋白质抗原，对鸡新城疫脂质体-基因工程亚单位疫苗进行了系统的研究，取得了如下结果：1．利用血凝试验及血凝抑制试验对重组病毒进行了鉴定，证明重组 杆状病毒特异性地表达了鸡新城疫病毒的血凝素-神经氨酸苷酶 蛋白（Hemagglutinin-neuraminidase protein，HNP）。2．通过反复的摸索及实践，发现在该脂质体疫苗的制备中，卵磷脂 与胆固醇的最佳质量比为2:1，病毒液的最适pH值为7.2-7.6，成 功地建立了脂质体-鸡新城疫基因工程亚单位疫苗制备技术。 山东帅他人学攸I：毕业论义 鸡新城疫林H丁程亚平位疫苗的研九3．利用电子显微镜、紫外分光光度计、无菌检验、安全性检验等对 脂质体疫苗进行了质量检测，结果表明研制的脂质体疫苗符合常 规疫苗的质量要求。4．对脂质体疫苗进行了免疫剂量筛选试验和免疫效力检测，结果表 明脂质体疫苗免疫后的血凝抑制抗体效价可达 51 OgZ，攻毒保护 率为60％，免疫后IL－2（lute，1。。巾i n 2，IL－2）的表达量增加。 通过本研究，成功建立了脂质体－鸡新城疫基因工程亚单位疫苗制备技术，为脂质体－重组蛋白疫苗的研制提供了有重要参考价值的‘欠验十物学数折Z，为脂质休疫十穴’1；，。”中’文际应用打卜了良灯的尽川比。