【摘 要】
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微球因其具有规整的形态和可控的直径(几十至数百微米)已经广泛用作细胞可注射载体。同高分子微球相比,无机微球由于在水溶液中不易溶胀而呈现更为稳定的形态与结构,备受研究者青睐。尤其是中空微球,不仅可以用作细胞载体,而且能够装载生物活性分子以调节细胞的功能或材料的抗菌性能。羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HAp)微球是一种典型的无机矿物微球,具有优良的生物相容性和骨传导性,已经广泛用作骨组织再
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微球因其具有规整的形态和可控的直径(几十至数百微米)已经广泛用作细胞可注射载体。同高分子微球相比,无机微球由于在水溶液中不易溶胀而呈现更为稳定的形态与结构,备受研究者青睐。尤其是中空微球,不仅可以用作细胞载体,而且能够装载生物活性分子以调节细胞的功能或材料的抗菌性能。羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HAp)微球是一种典型的无机矿物微球,具有优良的生物相容性和骨传导性,已经广泛用作骨组织再生材料和药物释放系统。尺寸较小的中空HAp微球已经广泛用作药物释放载体;然而,如何制备尺寸较大的中空HAp微球作为细胞载体仍是当前研究的难点之一。因此,本论文提出以乳化交联法所制备的壳聚糖(Chitosan,CS)微球为基质材料和牺牲模板,结合原位矿化法和高温烧结,成功制备了多孔中空HAp微球;随后将多孔中空HAp微球与成骨细胞共培养,评价其生物相容性;最后以抗生素为模型药物,评价了该微球的药物释放性能。本论文主要包括五个部分。1)CS微球的制备与表征CS微球是以CS水溶液为水相和植物油为油相,采用乳化法制得。利用SEM、FT-IR、XRD等对微球的理化性质进行表征。SEM观察表明,所制备的微球呈现规整球形,其直径受到搅拌速度等因素的影响,随着搅拌速度的增加,微球直径逐渐减小。搅拌速度为300 rpm时,微球直径可控制在900μm上下;搅拌速度为500 rpm时直径可控制在400μm至500μm;搅拌速度为700 rpm时直径可控制在100μm至200μm。FT-IR测试表明,CS微球含有C-O、-OH和-NH2等特征基团。XRD测试表明,CS微球呈现无定型结构。2)CS@HAp复合微球的制备与表征CS@HAp复合微球是将上述在转速为700 rpm时所制备的CS微球在钙盐溶液和磷酸盐溶液中原位矿化制得。利用SEM、FT-IR、XRD等对微球的理化性质进行表征。SEM观察表明,复合微球呈现规整球形,直径可控制在100μm至200μm。EDS测试表明,复合微球主要由C、O、P和Ca元素组成。FT-IR测试表明,复合微球含有-PO4等特征基团。XRD测试表明,复合微球出现HAp的特征衍射峰。3)HAp微球的制备与表征HAp微球是将上述经矿化制备的CS@HAp复合微球经高温煅烧去除CS有机成分而制得。利用SEM、FT-IR、XRD等对微球的理化性质进行表征。SEM观察表明,微球呈现规整球形,内部为中空结构,壁厚约25μm,表面为有褶皱的多孔结构,直径可控制在100μm至200μm。EDS测试表明,微球主要由O、P和Ca元素组成,其Ca/P比约为1.7。FT-IR测试表明,微球含有-PO4等特征基团。XRD测试表明,微球出现HAp的特征衍射峰。4)多孔中空HAp微球的生物相容性评价结合细胞培养方式,将所制备的多孔中空HAp微球与成骨细胞共培养,采用MTT细胞活力测试方法和活死细胞染色法测试细胞的活性,评价微球的生物相容性;并利用SEM观察细胞的表面形态。结果表明,微球呈现优良的生物相容性。5)多孔中空HAp微球的药物释放性能研究以盐酸四环素(TH)为模型药物,对中空多孔HAp微球的药物装载与释放能力进行研究。结果表明,HAp@TH复合微球与大肠杆菌和金黄色葡萄球菌共培养后,能够维持TH的药物有效性,呈现较强的抗菌性能,能够显著抑制细菌的生长。
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