【摘 要】
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产气荚膜梭菌,又名魏氏梭菌,能引起人类气性坏疽和多种动物的坏死性肠炎及肠毒血症,是近年来导致我国家畜“猝死症”的主要病原。利用梭菌培养过程中产生的毒素可实现梭菌性疾病的有效免疫,因此,培养此类细菌,获得高浓度、强毒力的毒素,可制备免疫效果优良的疫苗。羊三联四防灭活疫苗（羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、肠毒血症）就是其中之一,在我国被广泛使用。目前专业疫苗公司在培养产气荚膜梭菌生产中大多使用厌气肉肝胃酶消化
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产气荚膜梭菌,又名魏氏梭菌,能引起人类气性坏疽和多种动物的坏死性肠炎及肠毒血症,是近年来导致我国家畜“猝死症”的主要病原。利用梭菌培养过程中产生的毒素可实现梭菌性疾病的有效免疫,因此,培养此类细菌,获得高浓度、强毒力的毒素,可制备免疫效果优良的疫苗。羊三联四防灭活疫苗（羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、肠毒血症）就是其中之一,在我国被广泛使用。目前专业疫苗公司在培养产气荚膜梭菌生产中大多使用厌气肉肝胃酶消化汤作为培养基,该培养基需要牛肉、肝、胃蛋白酶等原材料,产业化生产成本非常高。另一方面,受到上述原材料品质的影响（如肉品的新鲜度、抗生素的残留等）,培养基质量不易掌控,进而影响到成品疫苗质量的稳定性。其次,常规苗需大剂量免疫（5mL/只）,且免疫副反应较重。本研究克隆表达产气荚膜梭菌C58-1株α、β1、ε和β1-ε四种毒素蛋白,并通过小鼠和家兔的免疫保护试验验证这四种毒素蛋白作为亚单位疫苗的可能性;同时,优化了具有良好免疫保护力蛋白的高效表达条件,实现其工程化制备。我们克隆了产气荚膜梭菌C58-1株α、β1、ε和β1-ε基因片段,分别构建了表达载体pETα765、pETβ1927、p...
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