趋化因子结合蛋白CCX-CKR在人乳腺癌生长、转移复发中的作用及机制研究

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目的:趋化因子及其受体所组成的生物学轴参与肿瘤的生长和转移,如CXCR4/CXCL12、CCR7/CCL19(CCL21)、CCR9/CCL25以及CXCR5/CXCL13。而“非典型”趋化因子结合蛋白CCX-CKR可清除与其相结合的内环境稳定性趋化因子CCL19、CCL21、CCL25和CXCL13。本课题旨在研究CCX-CKR在人乳腺癌中可能的潜在调节作用。方法:检测各种人乳腺癌细胞中CCX-CKR的组成性表达和诱导性表达;建立CCX-CKR稳定过表达的人乳腺癌细胞株MDA-MB-435/CCX-CKR和MDA-MB-231HM/CCX-CKR,在体外观察转染后细胞生物学行为的改变,检测细胞培养上清中CCX-CKR高亲和配基hCCL19(ELC)、hCCL21(SLC,6Ckine)、hCCL25(TECK)和hCXCL13(BLC,BCA1)的水平;建立人乳腺癌BALB/c小鼠原位移植瘤模型,记录肿瘤生长曲线及肺转移情况,检测瘤内微血管密度(MVD)及趋化因子mCCL19(ELC)、mCCL21(SLC,6Ckine)、mCCL25(TECK)和mCXCL13(BLC,BCA1)的水平。选择98例乳腺癌患者的癌组织标本,用免疫组织化学方法检测组织中CCX-CKR蛋白的表达并分析其表达与临床特征、生存率以及预后的相关性。结果:各种人乳腺癌细胞差异性表达CCX-CKR。细胞因子IL-1β,TNF-a and IFN-γ可调节MDA-MB-435细胞中的CCX-CKR表达。体外实验中,CCX-CKR过表达可抑制人乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力;体内实验中,可减缓人乳腺癌细胞BALB/c裸小鼠移植瘤的生长和肺转移。在对人乳腺癌临床标本的分析中,研究发现CCX-CKR的表达与患者的腋窝淋巴结转移呈负相关,与生存率呈正相关;并且多因素分析发现,CCX-CKR的表达情况可作为乳腺癌患者预后的一个独立影响因素。结论:本实验首次阐明CCX-CKR在人乳腺癌中起负性调控作用,主要可能通过清除体内内环境稳定性趋化因子和直接或者间接减少肿瘤内新生血管的形成实现。本研究可能会为乳腺癌的多靶点治疗提供新的治疗策略。
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