TCF-4、P-gp和Bcl-xl在结直肠癌的表达与临床病理及预后的关系

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目的:  检测T细胞因子-4(Tcellfactor-4,TCF-4)、P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-xl(B-celllymphoma-extralarge,Bcl-xl)在结直肠癌、癌旁组织及正常黏膜组织中的表达,研究结直肠癌中TCF-4、P-gp、Bcl-xl及细胞凋亡的关系,并分析TCF-4、P-gp、Bcl-xl表达与临床病理指标的关系;探讨结直肠癌的多药耐药发生机制并判断是否可以作为结直肠癌预后的指标,为结直肠癌的防治奠定一定的理论基础。  方法:  1、收集50例结直肠癌患者术后新鲜标本,通过RT-PCR和WesternBlot,检测TCF-4、P-gp、Bcl-xl在结直肠癌组织、癌旁组织及正常组织中的表达,同时分析三者之间的相关性。  2.收集100例结直肠癌患者术后石蜡病理切片,应用TUNEL法进行细胞凋亡检测,计算凋亡指数(AI);并分析TCF-4与凋亡指数之间关系;应用免疫组化SP法检测TCF-4、P-gp和Bcl-xl在癌组织、癌旁组织和正常组织的表达;同时分析三者之间相关性以及与临床病理特质相关性。采用Kaplan-Meier生存分析、Cox回归分析和Logrank检验分析TCF-4、P-gp和Bcl-xl表达与临床病理特征和预后状况之间的关系,评价结直肠癌预后和复发的危险因素。  结果:  1、50例新鲜标本结直肠癌组织中TCF-4、P-gp和Bcl-xl的mRNA的表达量均明显高于癌旁组织及正常黏膜组织(P<0.001;P<0.001;P<0.001);且三者的mRNA之间表达呈正相关(r=0.338,P<0.05;r=0.557,P<0.05;r=0.390,P<0.05);结直肠癌组织中TCF-4、P-gp和Bcl-xl的蛋白的表达量均明显高于癌旁组织及正常黏膜组织(P<0.01;P<0.01;P<0.01);且三者的蛋白之间表达呈正相关(r=0.347,P<0.05;r=0.367,P<0.05;r=0.340,P<0.05)。  2、TCF-4阳性组细胞凋亡指数(AI)为0.845±0.069,TCF-4阴性组细胞凋亡指数(AI)为3.662±0.034,且TCF-4表达与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.589,P<0.01)。  3、免疫组化结果表明:100例石蜡标本结直肠癌组织、癌旁组织和正常黏膜组织中TCF-4、P-gp和Bcl-xl在结直肠癌组阳性表达率为85.00%、67.00%和84.00%;在癌旁组织阳性表达率为23%、11%和40%;在正常黏膜的阳性表达率为9%、2%和7%,三者在结直肠癌组织中的表达均高于癌旁组织和正常黏膜组织,(P<0.01;P<0.01;P<0.01)。结直肠癌组织中TCF-4和Bcl-xl阳性表达与肿瘤组织的分化程度呈正相关,结直肠癌组织中TCF-4、P-gp和Bcl-xl阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、组织学类型之间无显著相关(P>0.05),与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期及复发密切相关(P<0.05);结直肠癌组织中TCF-4、P-gp,Bcl-xl三者间表达呈正相关(χ2=9.047、r=0.301、P<0.01;χ2=29.418、r=0.581、P<0.01;χ2=15.197、r=0.390、P<0.01);Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析结果表明:TCF-4和Bcl-xl蛋白的阳性表达的术后5年累积生存率明显低于阴性表达组,(P<0.01);TCF-4和Bcl-xl蛋白的阳性表达是CRC患者肿瘤复发及不良预后独立危险因素。  结论:  1、TCF-4可能激活并上调了耐药蛋白P-gp和抗凋亡蛋白Bcl-xl表达,且抑制CRC细胞凋亡,可能降低了CRC细胞对化疗药物的敏感性和促进结直肠癌细胞MDR的产生。  2、结直肠癌组织中TCF-4、P-gp和Bcl-xl的表达与浸润、转移、TNM分期及复发密切相关,TCF-4和Bcl-xl蛋白还与肿瘤组织分化程度有关,可作为判断结直肠癌患者预后的指标;TCF-4、Bcl-xl蛋白的阳性表达是CRC患者肿瘤复发及不良预后独立危险因素。  3、CRC细胞对化疗药物敏感性的下降及CRCMDR的产生可能导致CRC的复发及不良预后。
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