论文部分内容阅读
低分子量的巯基化合物广泛分布在生物体的细胞和组织当中,对机体的新陈代谢和维持细胞平衡起着至关重要的作用。谷胱甘肽(GSH)是细胞内最丰富的非蛋白巯基化合物,是机体内巯基和硫化物的调节剂,对维持生物体内合适的氧化还原环境起着至关重要的作用。本文合成了一种含有Se-N键的电活性物质苤硒脑,在适当的条件下,苤硒脑可以和GSH发生亲核反应使得苤硒脑的浓度降低,通过测量苤硒脑峰电流的降低情况可以间接的测量出GSH的浓度。具体研究内容及创新研究成果如下:
1.合成电活性物质苤硒脑,并用元素分析、红外光谱的方法对其进行表征,然后用循环伏安法(CV)和微分脉冲伏安法(DPV)对苤硒脑和GSH的反应机理进行研究。结果显示,苤硒脑有很强的电化学活性,GSH可以在适当的条件下使苤硒脑中的Se-N键断裂。用苤硒脑检测GSH,不但反应快速、灵敏度高,而且具有良好的选择性。在0.20 mol·L-1 B-R缓冲溶液中(pH=2.0),GSH和苤硒脑反应生成邻苯二胺(OPD)。苤硒脑对GSH检测的线性范围为5.0×10-10~2.2×10-8 mol.L-1,相关系数为0.9940,检测限为8.3×10-11 mol·L-1(3σ,n=11)。论文对探针在检测GSH过程中的抗干扰能力进行了分析,结果显示,多种的生物活性试剂对于检测过程没有或者有很小、可以忽略的影响,说明苤硒脑对GSH的检测有着很强的抗干扰能力。论文还就苤硒脑对蛋白硫醇化合物和非蛋白硫醇的相应进行了进一步讨论,结果显示,相对于其它的非蛋白硫醇化合物如β-巯基乙醇(β-ME)、半胱氨酸(Cys)、巯基乙酸(TA)和二硫苏糖醇(DTT),苤硒脑对于GSH有着更好的响应,但是,GSH和蛋白巯基化合物像谷胱甘肽还原酶(GR)以及金属硫因(MT)相比,在相同条件下,后者的峰电流的降低趋势更加明显,说明蛋白巯基化合物对苤硒脑有着更好的响应。从小鼠的乳腺癌细胞4T-1和白血病细胞P388的检测效果可以看到,在不加入巯基封锁剂N-乙基马来酰亚胺(NEM)的情况下,苤硒脑对细胞中蛋白巯基的萃取液相对于非蛋白巯基的萃取液峰电流降低更加明显,说明探针苤硒脑对于癌细胞中的巯基化合物也有着很好的响应。
2.以2,9-二甲基-1,10-菲咯啉(C14H12N2)和反丁烯二酸(C4O4H4)为配体合成了电化学探针Mn2(C4H2O4)(NO3)2(C14H12N2)2(H2O)2,培养得到其晶体,其结构经红外光谱、核磁共振氢谱、元素分析和X-射线单晶衍射分析进行了表征。