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目的:建立中国人同一起源肿瘤不同恶性潜能前列腺癌动物模型,探讨动物模型的建立方法,模拟肿瘤在人体内的分化进展情况,筛选出去势组及非去势组恶性潜能不同的肿瘤组织,为研究前列腺癌转移进展机制及激素抵抗的发生机制提供理想的动物模型。 方法:本课题选取未经治疗经病理检查确诊为前列腺癌的手术切除标本,采用组织块外科原位移植方法分别移植到去势与非去势雄性裸鼠前列腺部,筛选出恶性潜能不同肿瘤建立模型。 1.标本筛选本院住院接受手术切除的前列腺癌标本,纳入标准:(1)肿瘤组织≥2 cm3;(2)术前未经过任何治疗(包括放疗、化疗、激素治疗等);(3)患者及家属理解并签署知情同意书。 2.常规病理组织学观察及免疫组化染色,评价肿瘤分期等指标。 3.原位及鼠间传代移植:将病人肿瘤标本剪成1-3mm3组织块,采用外科原位移植方法分别移植到A组(非去势组)、B组(去势组)裸鼠。9周后处死并解剖,取移植瘤同上反复进行鼠间前列腺原位传代移植,直至B组成瘤并出现淋巴结转移。 4.选取A组初代原位移植瘤灶(LA1)、A组原位移植第三代淋巴结转移瘤灶(LAN1)、B组第四代淋巴结转移瘤灶(LBN1)进行体外培养,分别建立肿瘤体外培养细胞系。 5.绘制细胞系生长曲线检测上述三种细胞系生长状态;Boyden Chamber细胞运动实验检测细胞迁徙转移能力。 6.裸鼠皮下异种移植瘤模型检测成瘤率、肿瘤湿重及浸润范围验证三种细胞系在裸鼠异种移植的生长状态。 结果: 1.原发肿瘤前列腺癌,Gleason评分3+3=6,前列腺内弥漫广泛浸润性生长,免疫组化示34β E12、P63、CK5/6、SMA等阴性,P504S、AR、PSA、PLAP阳性。 2.肿瘤组织块裸鼠前列腺癌原位移植A组成瘤率30%,无淋巴结转移,取移植瘤反复原位传代移植第三代成瘤率50%,盆腔淋巴结转移率40%。B组原代移植以及来自A组的原位移植瘤反复原位移植均未见移植瘤,源自A组淋巴结转移瘤反复原位传代移植至第四代,成瘤率33%,其中一只可见盆腔淋巴结转移。 3.三种细胞系细胞生长、迁徙以及体外裸鼠成瘤率均有显著差别。 结论: 1.采用组织块裸鼠前列腺原位外科移植可建立裸鼠前列腺癌异种原位移植模型。 2.裸鼠前列腺癌原位移植反复传代可增强肿瘤成瘤率、转移力等恶性指标。 3.以裸鼠淋巴结转移瘤接种去势裸鼠可筛选出激素非依赖性异种移植瘤及转移瘤。