农药残留是危害食品安全的重要因素之一，其中有机磷农药是目前使用最为广泛的一类农药，约占农药总使用量的70％，因此对有机磷农药的检测是食品安全检测的重要内容。目前用来检测有机磷农药的方法主要是气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC)，这些方法前处理步骤复杂，费时费力，设备昂贵，需要专业人员操作，适宜实验室检测，不适宜大量样品现场快速检测。酶联免疫吸附分析(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)方法快速、灵敏、选择性好，具有检测成本低，操作简便，安全可靠等优点，同时还适宜痕量物质的检测。近年来，有关农药的免疫检测方法已有一些报道，但多数为间接酶联免疫法。因此本实验研究直接竞争酶联免疫分析方法检测有机磷农药的技术，旨在用一步抗原抗体反应，快速的检测半抗原，方法简便，灵敏度高。本论文选取国家明令禁止使用的甲胺磷、甲基对硫磷、对硫磷三种高毒、高残留的有机磷杀虫剂为研究对象。根据其结构特点，首先合成了农药的半抗原，然后将半抗原与载体蛋白牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成免疫原和酶标抗原。用合成的免疫原免疫兔子后获得多克隆抗体，用间接ELISA测定三种抗体的效价分别为1：4000、1：4500、1：6000。并且与其他主要的有机磷农药进行交叉反应试验，试验表明交叉反应率都很低。通过直接竞争ELISA检测，确定甲胺磷、对硫磷、甲基对硫磷包被原(即抗体)和酶标抗原的最佳工作浓度分别为1：2000、0.001mg／mL，1：3000、0.01mg／mL，1：2000、1mg／mL以及三种农药的方法检测限分别达到0.01μg／mL、1μg／mL和0.01μg／mL，实验回收率均达到96％以上，并且与GC有很好的符合率。三种农药直接竞争ELISA方法的板内变异系数均低于5％，板间变异系数均低于15％。表明该方法有很好的稳定性。