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肌内脂肪含量是影响猪肉品质的重要因素。而育种过程中对高瘦肉率的长期选择,导致了肌内脂肪含量以及猪肉品质的下降。因此,提高肌内脂肪含量,同时不影响其它部位脂肪的沉积,特别是皮下脂肪,成为猪育种的一个重要目标。由于不同部位的脂肪在脂肪代谢与脂肪细胞分化能力上存在着差异,这为寻找调控脂肪在不同组织差异沉积的分子机理提供了可能性。为了解肌内脂肪与皮下脂肪差异沉积的机制,我们比较了源于皮下脂肪与肌内脂肪的前体脂肪细胞的分化能力,并对脂肪分化与沉积起关键调控作用的PPARy基因在两种细胞中的表达量进行了检测。随后预测了靶向PPARy的miRNA,并对其在两种细胞中的表达量进行了比较,最后通过双荧光报告系统对差异表达的miRNA进行靶向性验证。主要实验结果如下：1、在体外环境下,源于肌内脂肪组织的前体脂肪细胞在分化能力上强于皮下脂肪组织来源的前体脂肪细胞。DMI诱导分化9天后,肌内前体脂肪细胞脂质积聚水平显著高于皮下脂肪细胞(P<0.05)。对两种脂肪细胞中脂质代谢相关基因进行比较,结果表明,脂肪合成关键基因乙酰-CoA羧化酶(Acetyl-CoA Carboxylase, ACC)、脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase, FAS),以及脂肪降解相关基因脂肪甘油三酯脂酶(Adipose Triglyceride Lipase, ATGL)、激素敏感酯酶(Hormone Sensitive Lipase, HSL)在肌内脂肪细胞中的表达水平显著高于其在皮下脂肪细胞中的表达水平(P<0.05)。肌内脂肪细胞中脂肪细胞分化关键基因PPARy的mRNA表达及蛋白表达水平均显著高于其在皮下脂肪中的表达(P<0.05)。2、通过生物信息学预测获得miR-130a、miR-130b、miR128、miR-301、miR-27a和miR-27b等6个靶向PPARγ的miRNA。定量分析结果表明,miR-27a与miR-27b在皮下脂肪细胞的表达量显著高于肌内脂肪细胞中的表达量(P<0.05),而miR-130a、 miR-130b、miR128、miR-301的表达量在皮下脂肪细胞与肌内脂肪细胞中没有显著差异(P>0.05)。构建含PPARγ 3’-UTR序列的表达质粒pGL3-Control/PPARγ,荧光素酶活性分析表明,miR-27b可以靶向调控PPARγ。本研究表明,肌内前体脂肪细胞比皮下前体脂肪细胞在体外具有更强的分化能力。miR-27b能够靶向调控PPARγ, miR-27b在两种脂肪细胞中表达的差异能够导致PPARy在两种细胞中的表达差异,进而引起不同部位脂肪细胞分化能力的差异。