Transgelin2(Tagln2)在山羊胚胎着床期子宫中的表达与调控

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:heishenggg
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胚胎着床是妊娠建立的关键步骤,目前在人和啮齿类动物中,着床机理的研究很多,反刍动物研究相对滞后。Tagln2是一种肌动蛋白结合蛋白,通过影响微丝的聚合来调节微丝骨架,进而参与调节相关的细胞功能,例如:细胞增殖、分化、迁移、凋亡等。我们以前的研究表明:Tagln2参与小鼠和兔子的胚胎着床,表达于围着床期小鼠和兔的腔上皮和腺上皮。在山羊胚胎着床中,Tagln2是否发挥作用是值得研究的问题。目的:检测细胞骨架蛋白Tagln2在山羊早期妊娠、发情周期和激素处理子宫中的表达,以确定其是否与山羊胚胎着床相关以及是否受类固醇激素调控。材料与方法:以黑龙江本地山羊为材料,分别取发情周期第0、9、12、16天的子宫组织,早期妊娠第6、9、12、15、22、25、30、40、50、60天的子宫组织,以及双侧卵巢切除康复两个月后用雌激素、孕酮、雌激素和孕酮共同处理、油处理(对照)的子宫组织。采用原位杂交及Western blot方法,检测Tagln2在早期妊娠、发情周期和激素处理的山羊子宫中的表达方式及其类固醇激素调控。结果:在发情周期的山羊子宫中,Tagln2 mRNA主要在子宫腔上皮和腺上皮中表达。整个发情周期均检测至Tagln2 mRNA信号,在发情第9天其信号较强.Western blot检测到Tagln2蛋白在整个发情周期山羊子宫中均表达,并且在发情周期中第9天表达量最高。在山羊早期妊娠过程中,Tagln2 mRNA同样在于宫腔上皮和腺上皮中表达。随着妊娠的进行Tagln2 mRNA信号逐渐增强,尤其妊娠第25天以后Tagln2 mRNA在母胎界面信号越来越强,并且在子宫肉阜(胚胎与子宫粘附位点)显著高于非子宫肉阜。Tagln2蛋白表达与mRNA基本相符,随着妊娠的进行Tagln2蛋白表达明显上调。类固醇激素处理模型中,原位杂交和Western blot均显示孕酮上调Tagln2表达,雌激素则没有明显影响。结论:原位杂交和Western blot的结果表明Tagln2的表达呈现胚胎着床特异性,Tagln2表达于山羊胚胎着床期的子宫腔上皮和腺上皮中,并且随着着床和胎盘形成的进行,表达逐渐增强。推测Tagln2参与山羊胚胎着床和胎盘形成的过程。孕酮上调Tagln2的表达,雌激素对其表达无明显影响。Tagln2是高度保守的蛋白,在不同物种胚胎着床中都发挥作用,提示这个分子,可能以相同的机制参与不同种动物(小鼠、山羊、兔子)的胚胎着床。因此,‘Tagln2的作用机制值得深入研究。本实验为研究反刍动物胚胎着床和胎盘形成调控机制提供理论依据。
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