补骨脂颗粒对顺铂致小鼠卵巢损伤的保护作用

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化疗作为主要抗癌治疗手段,对女性卵巢的结构、功能均可产生严重损害,造成卵巢早衰及相关不孕。因此,如何在肿瘤治疗的同时保存妇女的卵巢功能,有着巨大的医学需求,是一个值得研究的重要课题。西医方面一般情况下采用雌激素替代疗法(hormone replacement therapy, HRT),但增加了雌激素依赖性肿瘤的发病风险。植物雌激素则具有双向调节的作用,避免了HRT的高副作用,是安全性更高的治疗成分。基于中医理论,本实验室对多种具有滋肾益精,调和气血的中药进行筛选,发现这些中药有植物雌激素样的作用。补骨脂就是其中的一味。此外,近年来补骨脂对于缓解化疗后副作用的研究也日渐趋多,主要是针对一些肾毒性,免疫功能退化等连锁效应。对于使用补骨脂颗粒对损伤的小鼠卵巢进行保护的实验研究很少。结合本实验室关于植物雌激素在妇科疾病的应用理论和研究经验,选用补骨脂颗粒对小鼠顺铂损伤的卵巢进行干预,观察其是否具有保护作用,并对临床用药提供新的依据和指导。本课题针对补骨脂颗粒对顺铂损伤的卵巢的保护机制进行两个水平的研究:1整体水平的研究顺铂是具有细胞毒作用的非特异性药物,具有较强的广谱抗癌作用。同时具有强烈的肝肾毒性作用。补骨脂对其保护作用体现在整体方面。1.1补骨脂颗粒不同剂量灌胃对顺铂损伤后小鼠形态和体重的影响顺铂腹腔注射后的小鼠毛色灰暗且炸立,目光呆滞,蜷卧少动,饮食量下降,体重急剧减少。停止注射顺铂,体重都有所回升,但症状改善差别明显。补骨脂颗粒不同剂量灌胃后,小鼠的形态和体重恢复良好,程度不一。1.2补骨脂颗粒不同剂量灌胃对小鼠肝、脾、肾脏器质量的影响顺铂对肝、肾毒性作用研究较多,腹腔注射顺铂造成肝、肾、脾脏器的损伤,如质量下降,脏器系数降低的等。用药补骨脂颗粒后,小鼠各项脏器系数的值都较模型组高,尤其是肾脏系数值。这也表明了补骨脂的补肾护肾的作用。1.3补骨脂颗粒不同剂量灌胃对小鼠卵巢和子宫质量和形态的影响顺铂对女性生殖器官的影响临床似于卵巢早衰,主要表现为(1)小鼠子宫和卵巢分泌功能下降,雌、孕激素水平紊乱,异于正常值。小鼠的卵巢和子宫质量及系数值有所下降;(2)HE染色可以观察到损伤后小鼠卵巢组织闭锁卵泡增多。免疫组化可以看到芳香化酶的表达减少。补骨脂颗粒大、中、小剂量组不同幅度的调节小鼠的激素水平与回归于正常值,并提高卵巢和子宫质量及系数。且增加发育中的卵泡数量,提高芳香化酶的表达,从而促进底物转化为雌激素。2细胞水平的研究2.1药理血清作用不同时间对卵巢颗粒细胞形态的影响顺铂损伤后,细胞形态发生改变:细胞破碎,贴壁不好,细胞内凹,核周出现空泡,胞质内的细胞器基本消失。补骨脂药理血清组的颗粒细胞相对规则,细胞碎屑较少。2.2药理血清作用不同时间对卵巢颗粒细胞数量的影响顺铂损伤前用CCK-8活细胞计数法测出的吸光度值,和顺铂作用后用MTT计数法测出的吸光度值进行比较。顺铂作用前,从吸光度值反映的卵巢颗粒细胞的数量可以作为基数。与顺铂作用后,间接反映的细胞数量对比,可以反映出补骨脂药理血清体外对卵巢颗粒细胞的保护作用,这个主要反映在细胞数量较模型组多。2.3药理血清作用不同时间对雌激素分泌的影响颗粒细胞芳香化酶的活性底,且底物含量较低,加入卵泡雌激素(FSH)刺激后,快速提高芳香化酶的活性,从而促进底物大量转化成雌激素,然后随着时间的迁移雌激素分泌量逐渐下降。补骨脂药理血清可以缓慢长久的提高芳香化酶的活性,使雌激素分泌量在一定时间内近于稳,维持在一定的范围内。综上所述,补骨脂颗粒可以在一定的剂量下对顺铂所致的卵巢损伤表现出良好的保护作用,可以在今后的临床用药方面提供理论指导。
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