【摘 要】
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该研究应用磷酯酰肌醇三磷酸激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)及蛋臼激酶B(Proteinkinase B,PKB)的抑制剂渥曼青霉素(Wortmannin,WT)和蛋白激酶C(Protein kinase C,
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该研究应用磷酯酰肌醇三磷酸激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)及蛋臼激酶B(Proteinkinase B,PKB)的抑制剂渥曼青霉素(Wortmannin,WT)和蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)的抑制剂GF-109203X(GFX)与培养的大鼠海马组织切片孵育,在离体水平上调GSK-3β(GSK-3的一个亚型),造成蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶系统失衡,经免疫印迹与免疫组织化学技术检测的实验结果显示:单用GFX组PHF-1位点和Tau-1磷酸化水平分别增高29﹪和21﹪,单用WT组分别增高46﹪和41﹪,而二者联合应用组分别增高68﹪和55﹪;异常过度磷酸化的tau蛋白电泳迁移速度减慢;联合应用WT和GFX则出现类似AD患者脑中NFT样细胞;若同时应用GSK-3β的特异性抑制剂氯化锂(Lithium chloride,LiCl),则可消除上述的tau蛋白过度磷酸化的作用;tau蛋白的过度磷酸化与细胞活性降低正相关.这些研究结果表明:GSK-3β在脑组织切片水平受PI3K/PKB和PKC的双重调节,激活的GSK-3β在tau蛋白磷酸化中起关键作用;在离体水平通过抑制PI3K/PKB途径激活了GSK-3β,发生tau蛋白的异常过度磷酸化,以及tau蛋白的集聚现象.该研究首次在脑片水平阐明了GSK-3β对tau蛋白在AD样磷酸化中的作用,为AD研究建立了脑片模型.
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