杜梨PbNHX1基因的克隆和功能鉴定

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梨是我国种植分布最广的水果之一,其年产量仅次于柑橘和苹果,梨产业的发展对地区农业经济的促进起着重要的作用。随着人们水活水平的提高,人们对水果的需求不断扩大,梨产业也迎来了巨大的发展。在生产当中,盐胁迫是一种最常见的环境因素,对植物的生长发育、地理分布、产量有着非常严重的影响。因此,在长期以来如何提高植物耐盐性一直是一个十分重要的研究方向,也是人们最广泛研究的课题之一。虽然采取一些人工的栽培方法可以提高植物的耐盐性,但最有效的解决办法还是培育出耐盐新品种。作为传统育种的补充,当前基因工程已经被证明是一种高效可行的新方法,然而基因工程育种的前提是找到具有耐盐功能的基因。从已有的研究得知,植物NHX1基因在植物的耐盐胁迫当中扮演着重要的角色,所以本研究从杜梨(Pyrus betuLaefolia)中分离克隆得到PbNHX1基因,并对它的抗逆功能进行鉴定。主要目的是为了深入了解PbNHX1基因的抗性机理,从而获得具有自主知识产权的梨抗性基因资源。主要研究结果如下:在本研究中,我们采用电子克隆技术从杜梨当中得到了PbNHX1基因。PbNHX1基因具有完整的1635 bp的开放阅读框,编码544个氨基酸,相对分子量大约为60 KDa,等电点为8.85。多序列对比显示PbNHX1与其他物种的NHX基因有着很高的同源性,PbNHX1基因定位在细胞膜,表达模式分析显示,它能被盐胁迫和干旱诱导。PbNHX1基因在烟草中的超表达表明,转基因的植物和未转基因的植株相比,抗盐胁迫的能力有显著提高。盐胁迫的条件下,转基因植株比未转化植株的活性氧积累低,基因的表达量、叶绿素含量及三种抗氧化酶的活性均比对照高。以上结果表明,PbNHX1基因能有效提高转化植株的抗盐能力,是未来基因工程抗性育种的重要侯选基因。
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