【摘 要】
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目的:通过观察康莱特注射液(KLT)对体外肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响作用,初步探讨其机制,为其能否应用于肝癌的临床治疗提供理论依据。方法:体外培养人肝癌细胞HepG2,用不
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目的:通过观察康莱特注射液(KLT)对体外肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响作用,初步探讨其机制,为其能否应用于肝癌的临床治疗提供理论依据。方法:体外培养人肝癌细胞HepG2,用不同浓度的KLT(5μl/ml、10μl/ml、15μl/ml、20μl/ml)培养肝癌细胞HepG2。采用细胞毒试验(MTT法)观察不同浓度和作用时间的康莱特对HepG2细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测药物作用后HepG2细胞凋亡的发生,并检测相关凋亡蛋白Fas和Fas-L的变化,荧光定量PCR检测Fas mRNA和Fas-L mRNA的表达,并与空白对照组进行对比。结果:(1)KLT能明显抑制人肝癌细胞HepG2的生长,且呈时间和浓度依赖性;随药物浓度加大和作用时间延长,存活细胞数量逐渐减少;(2)流式细胞术证实KLT可诱导肝癌细胞HepG2凋亡;与对照组比较,实验组细胞凋亡率明显增加;(3)与对照组相比,KLT处理组HepG2细胞中Fas蛋白分别升高11.01%、18.71%、28.71%、37.15%,Fas-L蛋白分别升高1.49%、1.91%、3.27%、3.38%,与对照组比较差异有统计学意义(p<0.05):(4)荧光定量PCR结果表明Fas mRNA和Fas-L mRNA含量升高,与对照组比较差异有统计学意义(p<0.05)。结论:(1)KLT可通过抑制细胞增殖和诱导凋亡途径抑制人肝癌细胞HepG2的生长;(2)KLT可升高肝癌细胞HepG2 Fas和Fas-L蛋白的表达和诱导HepG2细胞FasmRNA和Fas-L mRNA含量升高,可能通过此途径发挥其抑制细胞增殖、诱导凋亡的作用。
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