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本研究以猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因的B、C抗原位点区为目的基因，设计一对特异性引物进行扩增，将目的基因克隆至原核表达载体pET-32a，构建重组表达质粒。将重组质粒转入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株后，以IPTG诱导目的蛋白的表达。表达产物纯化后经SDS-PAGE电泳，得到42KD左右的单一清晰的蛋白条带，与预期结果相符。经Western-blot检测证明，重组蛋白具有与猪传染性胃肠炎病毒阳性血清反应的反应原性。
将纯化的TGEV重组S蛋白作为免疫抗原，对BALB/c小鼠进行免疫，效价达到要求后按常规方法进行小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞的融合，用间接ELISA对融合细胞进行筛选，对阳性细胞采用有限稀释法进行3次亚克隆后，最终获得1株能稳定分泌抗重组S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，命名为3Dll。间接ELISA检测其细胞培养上清的效价为1∶6400。
以猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒(PRV)浓缩作为抗原，与制备的3Dll株杂交瘤细胞上清进行间接ELISA检测，结果显示，3Dll株细胞上清与TGEV反应显著，而与PEDV、PRRSV和PRV不存在交叉反应。说明获得的单抗具有高度特异性。
以感染和未感染TGEV的PK-15细胞培养物上清作为抗原对获得的羊抗进行间接免疫荧光实验，结果在感染TGEV的细胞中出现强荧光，未感染TGEV的细胞未出现荧光，试验结果表明，制备的单克隆抗体特异性较强，为进一步建立猪传染性胃肠炎的诊断方法奠定了重要的基础。
本试验还建立了快速检测TGEV的荧光定量RT-PCR方法。根据TGEV保守的N基因和猪呼吸道冠状病毒(PRCV)缺失的部分S基因序列分别设计合成了两对引物和两条TaqMan探针，通过优化各项反应条件，建立了实时荧光定量RT-PCR方法，该方法能有效地鉴别序列密切相关的TGEV与PRCV。与常规RT-PCR试验相比较，建立的荧光RT-PCR检测技术快速、敏感，检测时限3个小时以内，具有很好的特异性和重复性。