大白菜软腐病颉颃细菌的分离、筛选及鉴定

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软腐病属于细菌性病害,因其危害性被称为大白菜三大病害之一,由软腐欧文氏菌(Erwinia. carotovora)引起。该病害在前期干旱、后期多雨或灌溉不当情况下,很容易在生产中大面积流行,造成严重减产,是影响大白菜优质、稳产的重要因素。目前,对该病的防治主要采用选育抗病品种和药剂防治相结合的方法,但效果并不十分理想。本试验旨在从白菜根际土壤中分离、筛选出对大白菜软腐病菌有较好颉颃作用的颉颃细菌;对颉颃效果较好的生防菌株进行发酵优化和鉴定,以期为白菜软腐病的防治提供新的解决方案。(1)本试验首次从采自陕西杨凌、周至和西藏拉萨、林芝地区白菜根际的7个土样中分离得到了254株细菌,通过琼脂平板和液体发酵平板初筛试验、盆栽复筛试验得到了一株对白菜软腐病菌具有强烈颉颃作用的新菌株L227-3。(2)菌株L227-3的抑菌谱测定结果表明:该菌株抑菌谱较广,其发酵液对多种病原菌有很高的颉颃活性;室内检测对供试的病原真菌和细菌都有较好的抑制效果,其中对大白菜软腐病菌和小麦全蚀病菌的抑制能力最强。(3)将颉颃菌株L227-3接种于白菜伤口处,观察颉颃菌对白菜的影响,结果表明,L227-3菌株为无毒菌株,对白菜无不良影响。(4)利用玻皿培养法测定了颉颃菌L227-3对白菜种子萌发及胚根生长的影响,发现颉颃菌对白菜种子萌发无不良影响。且经颉颃细菌处理后的胚根长度明显大于单用清水处理的胚根长度,胚根生长势也相对旺盛。(5)对L227-3菌株发酵条件进行了优化,确定该菌株的最佳培养时间是30 h,最适生长温度31℃,且培养基初始pH为7.0,装液量50 mL,摇瓶转速为150 r/min时,L227-3菌株发酵液的抑菌效果最佳。添加PA能促进L227-3菌株细胞生长、繁殖,提高菌株的发酵性能,缓和pH的变化对菌株生长的影响,增强L227-3菌株的抑菌能力。(6)按照传统鉴定方法,根据菌株L227-3的培养性状、形态特征、染色反应及一些生理生化反应的试验结果,并参照相关文献,初步判定为多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。此外,本试验采用马铃薯块茎法对市售常用的生物农药进行了室内筛选,并对防治效果较好的药剂进行了盆栽药效试验。结果表明,马铃薯块茎法与盆栽药效试验的结果间有一定的相关性,但并不具有完全的一致性;丰灵和72%农用链霉素是较为理想的防治药剂。
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