稻瘟病是水稻上重要的病害之一,其病原菌为子囊菌Magnaporthe oryzae。稻瘟病菌分生孢子的萌发、附着胞的分化和侵染寄主的过程受到一系列基因的调控。其中,附着胞的形成是一个复杂的过程,涉及到叶片表面诱导信号的感知,信号的跨膜传导以及在细胞内引起的磷酸化级联反应。Ca²⁺信号途径作为四条重要的调节稻瘟病菌附着胞形成的信号途径之一,参与了稻瘟病菌孢子萌发及疏水条件下附着胞形成过程的调控。本文克隆了稻瘟病菌Ca²⁺号途径相关基因CMK、PLA2以及PLC基因。通过基因取代的方法分析了CMK和PLA2基因在稻瘟病菌致病及其他相关过程的作用。具体研究结果如下:1.在稻瘟病菌基因组数据库中进行BLAST分析,获得这三个基因的基本信息后,分别构建基因敲除载体。2.通过稻瘟病菌原生质体转化,利用同源双交换的方法将原生质体基因组中的CMK和PLA2基因靶向敲除,获得基因CMK缺失突变体△CMK和基因PLA2缺失突变体△PLA2。3.突变体△CMK和突变体△PLA2在CM培养基上的菌落心态发生变化,生长速度无明显改变;产孢量下降;分生孢子的萌发和附着胞的形成延迟;附着胞膨压显著下降,在完整的水稻和大麦叶片上致病性减弱。育性受到影响。突变体△CMK育性受到影响;突变体△PLA2育性未受到影响。