背景与目的：　　食管鳞状细胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）是食管癌最常见的亚型，我国南方沿海潮汕地区是食管鳞癌的高发区之一。Toll样受体（Toll-like receptors, TLRs）作为一种重要的模式识别受体（Pattern recognition receptors, PRRs），可识别病原/损伤相关分子模式（Pathogen-associated molecular patterns, PAMPs/Damage-related molecular patterns, DAMPs），启动TLR信号传导，激活核因子-κB（Nuclear factor-κB, NF-kB）和干扰素调节因子（Interferon regulatory factors, IRFs），诱导促炎细胞因子和I型干扰素（type I IFN, IFN-I）的产生，在机体固有免疫应答中发挥重要作用。TLRs 在肿瘤中充当双刃剑，它可诱导抗肿瘤免疫应答以抑制肿瘤进展，但当其被持续激活引起炎症反应持续存在时，形成适合肿瘤细胞增殖（抗凋亡）和逃避免疫应答所必需的微环境，增强肿瘤细胞的侵袭和转移，在肿瘤的发生发展过程中起到重要作用。　　本研究基于潮汕地区食管鳞癌高发背景，通过免疫组织化学方法检测食管鳞癌及配对正常食管组织中TLR3和TLR4蛋白表达情况，探讨TLR3和TLR4蛋白表达情况对食管鳞癌患者预后的影响；并结合课题组前期研究结果，对食管鳞癌及配对正常食管组织中TLR3和TLR4拷贝数变异和甲基化差异水平进行分析，从基因组和表观遗传层面探讨影响食管鳞癌中TLR3和TLR4蛋白表达水平的可能机制，为食管鳞癌患者预后评估提供筛选依据。　　材料与方法：　　1、标本收集：收集汕头大学医学院附属肿瘤医院2006~2010年及2013~2014年间148例术前未经放化疗食管鳞癌患者的手术标本，其中 61 例食管鳞癌配有正常食管组织（50例配对石蜡样本用于免疫组化，38例配对新鲜组织样本用于实时荧光定量PCR （Real-time quantitative PCR, qPCR）（其中免疫组化和qPCR重合样本27例）），免疫组化共137例食管鳞癌患者均有随访资料。　　2、免疫组织化学染色：HE染色观察肿瘤组织类型、分化程度、浸润深度以及淋巴结转移等情况；Envision两步法检测TLR3和TLR4蛋白表达情况。　　3、图像采集与分析：利用OLYMPUS BX43显微镜及图像采集软件OLYMPUS cellSens Entry 1.8进行拍照，并对TLR3和TLR4蛋白表达情况进行组织学评分。　　4、课题组前期全基因组及全外显子测序数据再分析及甲基化850K芯片检测数据分析，分析食管鳞癌中TLR3和TLR4拷贝数变异及DNA甲基化差异水平。　　5、qPCR：提取食管鳞癌及正常食管组织基因组DNA（genomic DNA, gDNA），用于qPCR实验检测TLR3和TLR4拷贝数变异情况。　　6、统计分析：采用IBM SPSS statistics 19进行数据分析处理。采用配对样本t检验/Wilcoxon检验、Pearson?2检验、log-rank检验、Cox比例风险回归模型及Pearson/Spearman相关分析等进行统计分析。P<0.05为差异具有统计学意义。　　研究结果：　　1、与正常食管组织相比，食管鳞癌里TLR3和TLR4蛋白表达均上调，差异均具统计学意义（P<0.001）。　　2、TLR3蛋白高表达的食管鳞癌患者生存期长（HR = 0.563，95%CI: 0.372-0.854）；Cox比例风险回归模型分析发现，除TLR3蛋白高表达外，肿瘤直径及病理分期也是影响食管鳞癌患者预后的独立因素。　　3、与正常食管组织相比，TLR3和TLR4拷贝数变异不显著；相关性分析显示，TLR3和TLR4拷贝数变异与其蛋白表达间未见明显相关性。　　4、与正常食管组织相比，TLR4基因启动子区（TLR4_1, chr9:120466632-120466691）发生低甲基化（P adj=0.0003）；相关性分析显示，TLR4甲基化水平与其蛋白表达呈负相关（rs=-0.519, P=0.040）。　　结论：　　1、与正常食管鳞状上皮相比，食管鳞癌中TLR3和TLR4蛋白表达上调。　　2、TLR3蛋白高表达的食管鳞癌患者预后好，可作为患者预后评估的分子标记。　　3、食管鳞癌中TLR4启动子区低甲基化可能参与其蛋白表达上调过程。