【摘 要】
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目的:本研究探讨CBLB是否通过抑制上皮间质转换进而抑制骨肉瘤细胞侵袭及迁移,为骨肉瘤靶向治疗提供理论基础。方法:1.过表达CBLB的骨肉瘤细胞,采用蛋白印迹和PCR检测效率,通过CCK-8、划痕愈合及Transwell、粘附实验分析过表达CBLB对骨肉瘤细胞的增值、侵袭及迁移能力的影响。2.采用瞬时转染法下调骨肉瘤细胞的CBLB表达,检测其对骨肉瘤增值、迁移、侵袭能力的影响。3.上调或下调细胞中
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目的:本研究探讨CBLB是否通过抑制上皮间质转换进而抑制骨肉瘤细胞侵袭及迁移,为骨肉瘤靶向治疗提供理论基础。方法:1.过表达CBLB的骨肉瘤细胞,采用蛋白印迹和PCR检测效率,通过CCK-8、划痕愈合及Transwell、粘附实验分析过表达CBLB对骨肉瘤细胞的增值、侵袭及迁移能力的影响。2.采用瞬时转染法下调骨肉瘤细胞的CBLB表达,检测其对骨肉瘤增值、迁移、侵袭能力的影响。3.上调或下调细胞中的CBLB表达后检测EMT相关蛋白的变化,在上调CBLB细胞中加入TGF-β,通过transwell和划痕实验检测其对迁移、侵袭的影响。结果:1.上调骨肉瘤细胞中CBLB的表达后,蛋白印迹及q PCR显示细胞中CBLB表达量明显高于NC组（P＜0.01）;CCK-8检测结果显示骨肉瘤细胞增值能力下降,划痕实验及Transwell实验显示过表达CBLB细胞的迁移、侵袭能力低于NC组（P＜0.05）2.下调U2OS细胞的CBLB表达后,其增值、迁移、侵袭能力明显增强（P＜0.05）;3.在CBLB过表达细胞中,EMT被抑制,表现为E-cadherin蛋白升高,而N-cadherin及Vimentin蛋白明显下降,而下调骨肉瘤细胞CBLB后,E-cadherin下降,N-cadherin和Vimentin蛋白表达升高;而且上调CBLB后抑制骨肉瘤细胞迁移、侵袭作用能被TGF-β减弱。结论:CBLB通过抑制EMT的发生进而降低骨肉瘤细胞的侵袭及迁移性,CBLB可能是骨肉瘤靶向疗法的潜在生物标志物。
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