研究背景慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)作为一种慢性炎症性疾病,以气流受限不完全可逆为特征,呈进行性发展,与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关。慢性阻塞性肺疾病由于患病人数多,死亡率高,社会经济负担重,目前居全球死亡原因的第4位,世界银行/世界卫生组织公布,至2020年COPD将位居世界疾病经济负担的第5位。吸烟是导致慢性阻塞性肺疾病主要原因,香烟中含有大量的氧化剂(如NO等),长期吸烟可导致肺部氧化应激。氧化应激与肺部炎症相互作用,共同促进COPD的发生与发展。COPD是一种气流受限不可逆的慢性炎症性疾病,无特效药物可治疗,无药物可逆转,戒烟是防治COPD的有效方法。现在国内外研究对COPD的发生机制仍未有统一说法,但都认为与吸烟有密不可分的关系。炎症学说认为吸烟可刺激肺泡巨噬细胞通过分泌多种细胞因子(如TNF-α)、细胞趋化因子(如IL-8)及蛋白酶等介导COPD气道炎症及肺组织损伤。氧化应激学说认为,香烟的烟雾含有高度活性的氧化物,如一氧化氮(NO)等,这些氧化物质可以直接增加体内的氧化剂负荷,通过细胞膜的脂质过氧化作用,导致COPD气道损伤及炎症,同时也刺激体内炎症细胞释放内源性氧化剂,进一步增加体内氧化物质的含量。现国内外对吸烟导致大鼠肺损伤及探讨吸烟对肺部炎症指标影响的研究较多,也有不少实验证明对大鼠进行一定浓度的烟熏2-3月可形成大鼠COPD的模型。但关于戒烟对给予烟熏后的大鼠的肺部炎症反应、氧化应激反应研究较少,本课题旨在动态观察香烟暴露与戒烟对肺部炎症反应、氧化应激反应及组蛋白修饰作用的影响,探讨吸烟导致COPD的发病机制,观察戒烟后相关指标能否逆转,为COPD的下一步治疗提供一些临床思路。目的观察香烟暴露及戒烟对大鼠支气管肺泡灌洗液IL-8,GSH及肺组织HDAC2蛋白的影响,探讨其意义。方法50只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(A组)、吸烟1月组(B组)、吸烟2月组(C组)、戒烟1月组(D组)、戒烟2月组(E组)。每组各10只,吸烟组及戒烟组大鼠每天上下午在自制熏烟盒中各给予烟熏两次,吸烟组分别在吸烟1月、2月后取材;戒烟组在给予两月烟熏后停止,分别正常饲养1月、2月取材。正常对照组在正常饲养四月后取材。通过肺组织HE染色观察气道炎症改变、收集支气管肺泡灌洗液(BALF),用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-8(IL-8)、谷胱甘肽(GSH)含量表达。通过免疫组化方法检测肺组织HDAC2的表达。结果(1)与正常对照组相比,吸烟组支气管肺泡灌洗液IL-8含量逐渐升高(吸烟2月组>吸烟1月组);戒烟组支气管肺泡灌洗液IL-8含量大于正常对照组,但趋势是逐渐降低(戒烟2月组<戒烟1月组)。与吸烟组相比,戒烟组IL-8含量有所减少。(2)与正常对照组相比,吸烟1月组支气管肺泡灌洗液GSH含量升高,但吸烟2月组降低;戒烟组支气管肺泡灌洗液GSH含量小于正常对照组,但趋势是逐渐升高(戒烟2月组>戒烟1月组)。(3)与正常对照组相比,吸烟组肺组织HDAC2含量逐渐降低(吸烟2月组<吸烟1月组);戒烟组肺组织HDAC2含量小于正常对照组,但趋势是逐渐升高(戒烟2月组>戒烟1月组)。与吸烟组相比,戒烟组肺组织HDAC2含量有所回升。结论(1)香烟暴露可增加气道的炎症反应,戒烟后仍然存在,但有所减轻。(2)香烟暴露可刺激气道的氧化反应,戒烟后仍然不能回复正常,但有所改善。(3)香烟暴露可使肺部组织中组蛋白修饰酶HDAC2减少,抑制炎症基因表达作用减弱,戒烟后有所改善。