抑制胶质瘤EFEMP1联合STAT-3低表达的树突状细胞治疗大鼠胶质瘤的实验研究

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神经胶质瘤也称为胶质瘤,为中枢神经系统常见的神经上皮性肿瘤,肿瘤多起源于神经间质细胞,包括神经胶质、室管膜、脉络丛上皮及神经元。对于神经胶质瘤的治疗方式也不是一成不变的,需要综合考虑肿瘤的起源部位、肿瘤体积大小及肿瘤性质等因素,才能选择并制定出最佳的治疗方案。研究证明,促使胶质瘤细胞生长、增殖的主要原因是胶质瘤细胞本身具有低免疫原性特点,这也是胶质瘤细胞能够逃避机体免疫细胞的监视及杀伤的主要原因;其次,神经胶质瘤细胞具有分泌免疫抑制因子的能力,这些免疫抑制因子可降低免疫细胞对肿瘤的杀伤效应。因此,如何提高胶质瘤细胞的免疫原性,促进抗原提呈细胞对胶质瘤抗原的识别,降低其发生“免疫逃逸”现象的几率;如何阻止胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子,提高免疫细胞对胶质瘤细胞的杀伤效率,这些都是胶质瘤免疫治疗的研究重点。EFEMP1,即fibulin-3蛋白,其主要分布在细胞表面及细胞之间,主要功能是参与调节细胞与组织之间的生理活动,稳固细胞外基质结构完整。大量研究证明:EFEMP1参与并调节肿瘤细胞的生长及运动,在胶质瘤与EFEMP1的相关性研究中发现,通过对胶质瘤细胞内N ot c h信号通路和细胞内基质金属蛋白酶的控制,EFEMP1可以间接的控制胶质瘤细胞的生长、增殖及向周围组织侵袭的能力。因此我们提出了:可否通过抑制胶质瘤细胞EFEMP1的表达,从根本上降低胶质瘤细胞的活力,降低胶质瘤细胞对周围正常脑组织侵袭的实验设想,本课题也以此作为实验研究展开的关键切入点。树突状细胞(DCs)具有提呈胶质瘤抗原并辅助CTL杀伤胶质瘤细胞的重要功能。研究发现:STAT蛋白家族成员中的STAT-3与树突状细胞的分化成熟关系密切。STAT-3活化水平的增加,可以抑制树突状细胞的分化成熟。抑制树突状细胞的STAT-3活性后,可解除IL-10、TGF、VEGF等因子对树突状细胞的免疫抑制;并能够提高树突状细胞分泌细胞因子的水平。本课题拟将抑制胶质瘤细胞EFEMP1表达与降低树突状细胞STAT-3表达,两种治疗策略相结合。建立由EFEMP1低表达的胶质瘤细胞荷瘤的动物模型;利用慢病毒转染方式降低树突状细胞的STAT-3表达,制备出STAT3低水平表达的树突状细胞疫苗后,回输至荷瘤动物模型体内。通过与对照组比较动物模型的存活时间,荷瘤鼠胶质瘤组织内部淋巴细胞浸润、荷瘤鼠脾脏指数变化等实验指标,证实抑制胶质瘤EFEMP1联合低STAT-3表达的树突状细胞对于大鼠胶质瘤的治疗效果,为建立胶质瘤的新型免疫治疗策略提供理论支持。
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