目的:胶质母细胞瘤(GBM)是成人最常见、最具进击性的恶性脑肿瘤,伴随着高发病率和高死亡率。尽管医疗技术水平在不断完善,病人可以得到最积极的治疗,但由于肿瘤细胞的高度侵袭能力,使得完整的外科切除手术难以实现,导致患者预后情况并不理想。人端粒酶逆转录酶(hTERT)作为端粒酶的核心催化成分,在大多数肿瘤中都高表达,包括胶质母细胞瘤。除了能够延长端粒使细胞永生化这一经典作用外,hTERT还具有其他非依赖于端粒的功能。自噬是细胞的一种自我保护机制,当细胞处于应激状态下,通过自噬过程,细胞能够将自身受损的胞质有机物质或细胞器运输至溶酶体进行消化降解,并且将其重新利用。有研究表明,当细胞内活性氧(ROS)水平升高时,自噬过程会被激活,从而促进积聚的ROS的清除。反之,自噬过程被破坏,会导致ROS水平的紊乱,进而对细胞的生长增殖情况造成影响。因此,本文将探讨胶质母细胞瘤中hTERT与自噬之间的关系,以及对细胞的ROS及生长增殖情况的影响,为以后的临床治疗提供更多的分子依据。方法:首先,通过对数据库进行挖据,对比hTERT在人类胶质母细胞瘤样本和在正常样本中的表达情况,以及hTERT的不同表达水平对胶质母细胞瘤病人生存期的影响。然后,利用携带sh RNA的慢病毒感染U87胶质母细胞瘤细胞,构建稳定敲低hTERT蛋白的细胞系。采用克隆形成和细胞增殖实验检测hTERT对细胞增殖的影响;采用蛋白质免疫印迹法探讨hTERT与细胞自噬水平的关系。接着,采用荧光探针检测分析hTERT对ROS水平的调控作用,并通过抗氧化剂处理细胞检测细胞活力。最后,对自噬基因进行过表达,检测hTERT、自噬与细胞ROS水平之间的关系,并通过细胞活力检测分析hTERT表达、自噬及ROS水平对细胞活力的影响。结果:1、生物信息学分析结果表明hTERT的mRNA水平在胶质母细胞瘤中的表达较正常组织表达高,并且hTERT高表达的患者生存率较低。体外生物学实验表明hTERT敲低会引起胶质母细胞瘤细胞死亡,并且能明显降低细胞的生长与增殖。2、hTERT缺失能够抑制自噬的发生,进而导致胶质母细胞瘤细胞内ROS水平的增加,并对细胞的活力造成影响。3、在hTERT缺失的细胞中过表达自噬相关基因BECN1能够恢复自噬的发生,降低细胞内ROS的水平,并且恢复细胞活力。结论:生物信息学分析和生物学实验都表明,hTERT在胶质母细胞瘤的生长过程中扮演着重要角色。体外的生物学实验表明,除了经典的延伸端粒长度的作用外,hTERT还能够通过BECN1的介导诱导自噬的发生,降低胶质母细胞瘤ROS的水平,进而调控细胞的生长,为hTERT作为肿瘤临床治疗的一个有效靶点提供了更多的分子依据。