酪氨酸代谢通路在舞毒蛾感病后爬高行为中的作用研究

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舞毒蛾核型多角体病毒(Lymantria dispar multiple nucleopolyhedrovirus,Ld MNPV))感染舞毒蛾幼虫后,能够引起感病舞毒蛾幼虫显著上爬行为(国外俗称树顶病)。这种生物学现象受到了很多专家学者的关注,但其机理尚不明确。本研究通过病毒、真菌、细菌三种病原分别侵染舞毒蛾,对其进行行为观察和转录组分析比较,研究病毒与其他病原物感染舞毒蛾后行为与基因表达差异。通过对感染病毒的舞毒蛾与非感病舞毒蛾在转录组数据上的差异进行分析,推测与能量代谢有关。并选取与能量代谢相关三羧酸循环通路的中的部分基因,利用ds RNA干扰其特定基因的表达,探讨二者对树顶病的影响。取得研究结果如下:1.病毒、真菌、细菌三种病原物处理的舞毒蛾幼虫,观察72h内的上爬高度,从中可以发现,感染病毒的幼虫上爬明显,与感染细菌和感染真菌的相比都有显著差异(P<0.05),与感染真菌的相比没有显著差异,但真菌组与细菌组无显著差异。2.转录组测序鉴定舞毒蛾感染病毒、细菌、真菌72h时体内的差异表达基因,得到了44994条Unigene。感染金黄色葡萄球菌的幼虫与感染Ld MNPV的相比,有308个基因上调表达,有263个基因下调表达。感染金龟子绿僵菌的幼虫与感染Ld MNPV的相比,有623个基因上调表达,413个基因下调表达。感染金龟子绿僵菌的幼虫与感染金黄色葡萄球菌的相比,有417个基因上调表达,177个基因下调表达。3.在两两比较时,KEGG富集分析表示Toll和IMD信号通路是最富集的通路。除此之外较为富集的通路有过氧化物酶体、戊糖和葡萄糖醛酸的相互转化和细胞色素P450的异生素代谢通路、溶酶体通路、丙酮酸代谢通路。4.感染病毒与感染细菌或真菌的幼虫相比,烟酸和烟酰胺代谢路、丙酮酸代谢通路、柠檬酸循环通路、氧化磷酸化通路、胆固醇代谢通路这些通路都与能量代谢相关,并且其中基因上调表达,说明了Ld MNPV诱导舞毒蛾产生上爬行为与能量代谢有相关性;而且神经方面相关的神经活性配体-受体相互作用通路中也有较多基因上调表达,也说明了Ld MNPV诱导舞毒蛾产生上爬行为与神经系统有相关性。5.选取舞毒蛾与能量代谢相关的酪氨酸代谢通路的中的基因hpd与gstz1来验证其感染病毒后上爬行为是否与能量代谢相关。饲喂干扰hpd与gstz1基因的ds RNA并不引起舞毒蛾的死亡,而且也不会提前或延迟舞毒蛾核型多角体病毒杀死舞毒蛾的时间。但饲喂干扰hpd基因的ds RNA的Ld MNPV感染后幼虫相比于只饲喂舞毒蛾核型多角体病毒的幼虫,其受感染幼虫爬高能力显著低于只饲喂病毒的幼虫。6.饲喂干扰gstz1基因的ds RNA的Ld MNPV感染后幼虫,相比于只饲喂舞毒蛾核型多角体病毒,gstz1基因被干扰幼虫爬高能力极显著低于对照。以上结果说明舞毒蛾幼虫受到病毒感染后出现上爬行为,与感染真菌和细菌后的行为差异明显,为病毒感染引起的特殊生物学现象。转录组学数据分析表明,舞毒蛾幼虫受病毒感染后其能量代谢与神经系统相关通路基因表达量显著高于受细菌或真菌感染组。研究进一步发现舞毒蛾能量代谢相关酪氨酸代谢通路的中hpd与gstz1基因与该上爬行为的产生具有一定的相关性。
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