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目的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种进行性、局限于肺部、病因不明、以慢性进行性肺纤维化伴蜂窝状改变为特征的肺部疾病。发病机制尚不明确,预后不佳。目前临床上仍缺乏有效的治疗手段。其病理特点主要表现为肺泡上皮细胞损伤、成纤维细胞大量聚集以及细胞外基质聚积的普通间质性肺炎(usual interstitial pneumonia,UIP)。柴胡皂甙d(saikosaponin d,SSd)为中药柴胡的主要有效成分,研究表明其具有抗炎、抗肿瘤、抗器官纤维化等作用。本研究通过探讨SSd对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞增殖转化、胶原形成以及对TGF-β1/果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白家族(Smads)信号通路的影响,深入研究SSd抗肺纤维化的作用机制,以期为临床治疗IPF提供潜在的靶点。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HELF),设立五组:正常对照组(单纯含胎牛血清DMEM培养基培养)、模型组即1 ng/mL TGF-β1处理组、低浓度SSD组即1 ng/mL TGF-β1联合0.5μmol/L SSD处理组、中浓度SSD组即1 ng/mL TGF-β1联合1μmol/L SSD处理组和高浓度SSD组即1 ng/mL TGF-β1联合2μmol/L SSD处理组。通过CCK-8法检测各组HELF的增殖情况,荧光定量PCR法检测各组细胞中Smad2、Smad3、Smad7的mRNA相对表达水平,Western blottting法检测各组细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原蛋白(Col I)、Smad2、Smad3、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、p-Smad3、Smad7的蛋白表达水平。结果(1)与正常对照组比较,模型组细胞增殖活性明显增加(P<0.05),Col-I、α-SMA表达增加(P<0.05),Smad2和Smad3 mRNA的表达显著上调(P<0.05),Smad7mRNA表达显著下调(P<0.05);Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达显著增加(P<0.05),Smad7的蛋白表达显著下调(P<0.05);(2)与模型组比较,SSd不同剂量处理组细胞增殖降低(P<0.01),均逆转上述指标的改变,中高浓度组作用较明显,呈一定的剂量效应关系(P<0.05)。结论SSd能通过调控TGF-β1/Smad信号途径,抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞增殖转化及胶原生成,从而发挥对肺纤维化的治疗效果。