体外培养CD34<'+>细胞差异表达基因的筛选

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mingtian2060
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文选用DDRT-PCR和RAP-PCR两种经典技术来筛选体外短期扩增培养CD34+造血干/祖细胞的差异表达基因。在DDRT-PCR实验中,选用3个锚定引物和8个随机引物进行排列组合,得到8张具有代表性的RNA指纹图谱,并且切割了30个差异片段作为候选基因进行PCR再扩增、胶回收以及克隆实验。通过测序鉴定出5个基因,分别是:RAN、GallusmRNA、3BACRP11-615P1、RP11-433N2和RP1-10C16。对于RAP-PCR实验,选用8个随机引物对体外培养前后的CD34+细胞进行差异基因对比研究,得到3张RNA指纹图谱,回收了7条差异片段,经过测序和基因库同源性搜索,成功鉴定出一个功能未知的基因,DC24。 为了进一步证实实验结果的可靠性,对RAN和DC24基因进行半定量RT-PCR实验验证。半定量结果显示,经过静态和动态体系培养后的CD34+细胞内RAN基因的表达水平显著提高,分别是未培养的1.521和3.978倍;DC24基因的表达水平分别是未培养的2.374和14.275倍。以上结果表明RAN和DC24基因在CD34+细胞体外增殖过程中可能发挥重要作用。
其他文献
芳香醛是制备医药、染料、农药以及香料必不可少的中间体,它在工业上的应用极其广泛,需求量亦逐年增加。石油化工和煤化工的快速发展使获得大量廉价易得的甲苯类芳香烃成为可能
  DNA测序技术是遗传学研究的重要技术,它的出现极大地加快了分子生物学的发展,广泛地应用于分子生物学,遗传学,和基础医学领域。第一代测序技术在人类基因组计划中做出重
会议
  马铃薯引入中国400多年后,其种植区域遍及全国各地。目前,中国已成为世界上马铃薯种植面积和总产量最大的国家,分别约占世界的30%和25%。在过去一个多世纪里,中国马铃薯产业从
在Pt/C的存在下,邻硝基甲苯在甲醇和硫酸溶液中经催化氢化和Bamberger重排,生成了2-甲基-4-甲氧基苯胺,产率70.0%.用乙醇、丙醇等低碳醇代替甲醇在相同条件下进行反应,可分别
  维恩图(Venn Diagram)是一种非常直观、易懂,用于描述数据集合之间的交集、并集、补集等关系的图。在遗传学和基因组学领域中,维恩图被用于解决不同物种的基因或基因家族之
本论文利用稳态荧光、稳态荧光各向异性、紫外可见分光光度等方法,详细研究了荧光分子和不同环糊精的作用,发现这些分子可与环糊精生成纳米管,并估算了纳米管中环糊精的数目,给出
本文对14例I期原发性高血压患者及14例正常人血浆进行ANP放射免疫测定。实验结果显示原发性高血压患者心房肽水平高于正常人(p
动物血液是一种重要的生物资源,从一种生物原料中提取多种生物物质是生物生化分离工程的一个重要研究方向。本文采用层析纯化集成技术联合制备牛血超氧化物歧化酶(SOD)、过氧
  简化基因组技术是利用限制性内切酶降低基因组复杂度的基因分型测序技术。由于其使用一定大小的酶切片段所对应的序列作为整个基因组序列的部分代表,降低了基因组的复杂
目前,催化消除环境污染物研究中Cu是目前研究最多的过渡金属离子之一,有良好的应用前景。表面相互作用的研究是从本质上探索这类催化剂的各种物理化学特性的必经途径。它对了解分散在载体表面的离子化合物的存在状态和所得催化剂的性能(活性,选择性,稳定性)以及催化作用的本质有重要意义,可为催化剂设计和制备提供重要的科学依据。基于以上,本文主要围绕以含不同载量Cu的γ-Al2O3和硅铝分子筛作为模型催化剂,运用