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本文主要从以下几个部分展开论述： 第一部分 心血管疾病已成为全世界第一致死病因，动脉粥样硬化(arteriosclerosis，As)是该类疾病的主要病理基础，脂代谢异常是重要的致病因素之一。血浆低密度脂蛋白(lowdensity lipoprotein，LDL)和脂蛋白(a)[lipoproteint(a)，Lp(a)]是致As的独立危险因子。β2-GPⅠ(β2-glycoproteinⅠ，β2-GPⅠ)又称载脂蛋白H，是一种肝脏产生的血浆糖蛋白，易与凝血酶原、磷脂、肝素等带负电荷的物质结合，也可与LDL、Lp(a)结合。研究发现，IgA肾病、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)等患者体内存在稳定、不易解离的β2-GPⅠ/ox-LDL复合物。Ox-LDL由于其负电荷增加，较天然LDL更易与β2-GPⅠ结合。Lp(a)结构及体外氧化行为均同LDL相似。我们前期研究首次发现血循环中存在β2-GPⅠ-Lp(a)复合物，且SLE患者血清β2-GPⅠ-Lp(a)水平显著升高，SLE患者常伴随心血管疾病。据此，我们推测β2-GPⅠ-Lp(a)可能与CAD的发生、发展相关，可望成为As的生物标志物。本文对冠心病患者血浆β2-GPⅠ-Lp(a)水平进行分析，探讨其临床诊断价值及变化机制。 目的：分析冠心病患者血浆β2-GPⅠ-Lp(a)水平及变化机制，探讨与疾病发生、程度间的关系。 方法：采用本实验室建立的酶联免疫吸附试验法分别测定188例冠心病患者血浆β2-GPⅠ-Lp(a)复合物的水平，与正常对照组(n=100)比较，单、多因素分析β2-GPⅠ-Lp(a)复合物水平与冠心病发生、程度间的关系。 结果：与健康对照组相比，ACS及稳定性CAD患者β2-GPⅠ-Lp(a)水平显著升高[值经对数转换后：ACS组(0.22±0.45)U/ml；稳定性CAD组(0.05±0.55)U/mL；对照组(-0.31±0.61)U/mL]。单因素回归分析显示，高β2-GPⅠ-Lp(a)、ox-Lp(a)及Lp(a)是稳定性CAD发生的强危险因子[β2-GPⅠ-Lp(a)，OR3.17，95％CI1.65，6.07；ox-Lp(a)，OR2.54，95％CI1.33，4.85；Lp(a)，OR3.00，95％CI1.56，5.75]，且在ACS患者中更为显著[β2-GPⅠ-Lp(a)，OR5.38，95％CI2.97，9.74；ox-Lp(a)，OR7.55，95％CI4.12，13.84；Lp(a)，OR4.33，95％CI2.40，7.80]。多元回归分析显示在调整年龄、性别及血脂水平等因素影响后，β2-GPⅠ-Lp(a)和Lp(a)仍是ACS及稳定性CAD的强危险因素，而ox-Lp(a)仅是ACS发生的危险因素。ACS或稳定性CAD患者血浆β2-GPⅠ-Lp(a)水平与Lp(a)、ox-Lp(a)及冠脉造影确认的病变程度均呈显著正相关。且多元线性回归分析显示，ox-Lp(a)和冠状动脉最大狭窄程度共同解释46.2％的β2-GPⅠ-Lp(a)水平变化。 结论：冠心病患者β2-GPⅠ-Lp(a)复合物水平显著增加，ACS患者较稳定性CAD患者该复合物水平升高，与冠心病的发生和程度相关，可望作为As性疾病的强危险因子。 第二部分 冠心病(coronary artery disease，CAD)已经成为中国成年人高发病率和死亡率的首要原因。冠心病包括包括急性冠脉综合症(acute coronary disease，ACS)和稳定性CAD。冠心病患者发生急性冠脉事件的后果十分凶险，致死率、复发率高。微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是一类长度约为19～24个核苷酸的非编码单链小分子RNA，通过与靶mRNA3’端非翻译序列完全或部分互补结合，导致靶mRNA降解或转录后翻译抑制从而调控靶基因的表达。组织中高表达miRNA可以作为疾病的一类标志物，但取材不便、临床应用受限。近年来发现，体液中尤其是血清/血浆中也存在丰富、稳定的miRNA。研究发现，一些疾病例如癌症、心血管疾病患者血清/血浆中存在其特异的miRNA表达谱，可能作为诊断或疾病监测的一类标志物。因此，我们推测冠心病患者血浆中可能存在特异的miRNA表达谱，这种特异的miRNA表达谱可能作为疾病诊断、病情监测的一类新的标志物。 目的：筛选出ACS及稳定性CAD患者特异血浆miRNA表达谱，评价其对冠心病早期诊断及病情监测的价值。 方法：同期收集未经任何治疗的56例ACS、56例稳定性CAD、56例血脂异常低危人群及48例年龄、性别匹配的正常人血浆。首先运用高通量、高灵敏度的低密度芯片测序技术对50例ACS、50例稳定性CAD患者、50例血脂异常低危人群和50例正常人组成的四份混合血浆中667种miRNA的表达量进行测定，初筛冠心病患者、血脂异常低危人群与正常人相比表达显著上调的miRNA。然后运用实时荧光定量PCR技术(quantitive realtime PCR，qRT-PCR)对初筛的miRNA在56例ACS、56例稳定性CAD、56例血脂异常低危人群及48例正常血浆中逐一测定，筛选出在患者血浆中显著升高的miRNA。 结果：低密度芯片测序发现，ACS患者、稳定性CAD患者及血脂异常低危患者血浆表达谱与正常人均有显著差异，其中50多种miRNA在患者血浆中表达量显著高于正常人(2倍以上)。为进一步验证低密度芯片结果，筛选出其中18种显著升高的miRNA，通过qRT-PCR技术在验证组中逐一测定发现，有6种miRNA包括：miR-29b，miR-155，miR-186，miR-208b，miR-320a，miR-499在冠心病患者显著升高，且在ACS患者中升高更为显著。按血脂异常危险分层进一步分析其miRNA表达情况，发现血脂异常高危组和低危组较正常对照组上述6种miRNA表达亦显著升高，且miR-155、miR-208b、miR-499在血脂异常高危组升高更为明显。 结论：CAD患者、血脂异常低危人群和正常人血浆中存在丰富、稳定表达的miRNA，且与正常人具有显著差异；冠心病患者血浆中miR-29b，miR-155，miR-186，miR-208b，miR-320a和miR-499等6种miRNA的表达显著升高；上述miRNA的组合可能作为潜在的标志物对冠心病尤其是ACS进行诊断或病情监测，但仍需在大批量标本中进一步验证。血脂异常高危组和低危组较正常对照组上述6种miRNA亦表达上调，且miR-155、miR-208b、miR-499在血脂异常高危组升高更为明显。这些miRNA可能与脂质异常相关，可望成为疾病进程的标志。