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本项目研究了用金属离子螯合剂邻菲咯啉抑制瘤胃液微生物肽酶活性,从而提高饲料蛋白质利用效率的可行性。基于后续研究的需要和国内用放射性同位素双标记方法测定十二指肠、回肠食糜流量的现实困难,本项目首先建立了测定小肠食糜流通量的一种非同位素双标记方法。之后用体外法研究了邻菲咯啉对瘤胃肽酶抑制的最佳浓度,用体内法研究了邻菲咯啉对瘤胃蛋白质代谢的影响,最后比较了邻菲咯啉组、甲醛保护组与对照组对饲料蛋白质瘤胃降解率及其小肠消化率、全消化道消化率以及氮平衡的影响。旨在为合理利用饲料蛋白质、提高反刍动物的生产性能以及测定食糜流量提供基本参数和理论依据。 1非同位素双标记法测定十二指肠、回肠食糜流通量方法的研究 以4只安装有永久性瘤胃瘘管、十二指肠瘘管、回肠瘘管的小尾寒羊阉公羊为试验动物。采用Cr2O3、PEG为非同位素双标记法的固相和液相食糜标记物分别对于连续饲喂条件下标记物的回收率、标记物浓度达到平衡的时间、食糜流量的稳定性及标记物的瘤胃平均滞留时间等进行了研究。结果表明:Cr2O3、PEG的平均回收率分别为95.75±20.63%、91.48±12.63%。全食糜和食糜液相中的标记物Cr2O3、PEG浓度在4天之内基本达到了平衡。由标记物Cr2O3、PEG利用双标记法测得的十二指肠、回肠的平均食糜流量分别为:10.0543±1.7265 l/day,5.6295±0.9019 l/day,其变异系数分别为17.17%、11.60%,食糜流量结果具有较好的稳定性和可靠性。标记物Cr2O3、PEG的瘤胃平均滞留时间分别为:88小时,40小时。其浓度随时间的递降曲线分别为:Cr:y=O.38e-0.03974t(r=0.9750):PEG:Y=0.367e-0.09812t(r=0.8685)。 2邻菲咯啉对瘤胃微生物体外发酵的影响 采集4只安装永久性瘤胃瘘管的小尾寒羊阉公的瘤胃液,用体外法测定了不同浓度邻菲咯啉对瘤胃微生物发酵产气量、氨态氮浓度、真蛋白含量及饲料干物质消失率的影响。结果表明邻菲咯啉能够有效地抑制瘤胃微生物体外发酵的产气量、降低发酵液的氨氮浓度。发酵管内容物的真蛋白含量随邻菲咯啉浓度的增加而增加,成直线正相关关系,但内齐物的干物质消失率随邻菲咯啉的浓度增加而降低。经回归分析,存在以下线性关系: Y=-16.75X+29.52(r=0.7976,p<0.05),X为邻菲咯啉浓度(mmol/l),Y为发酵产气量(ml); Y=-0.5757X+3.3036(r=0.8384,p<0.05),X为邻菲咯啉浓度(mmol/l),Y为发酵液氨氮浓度(mg/100ml); Y=-10.14X+55.08(r=0.9275,p<0.01),X为邻菲咯啉浓度(mmol/l),Y为发酵液中干物质消失率(%); Y=1.35X+11.45(r=0.8423,p<0.05),X为邻菲咯啉浓度(mmol/l),Y为发酵液真蛋白含量(%)。 3不同浓度邻菲咯晰对瘤胃代谢的影响 以本试验选川4只安装有永久性瘤胃屡管的小尾寒羊阉公羊作为试验动物。自身对 照,前后对比。试验分为对照、试验卜试验*、试验*共四期,每期 10天,分别喂给 试验动物含邻菲咯$ 0 e、0.sthe、l刀 g/kg二 g/kg颗粒料。适应 8天后,每隔 4 ,J’ 时由瘤胃屡管采集瘤胃液连续采集2大,研究邻菲咯咐对瘤胃液氨氮、真蛋白、M、 小肽含量的影响。结果表明:邻菲咯琳明显的抑制瘤胃液氨氮含量,其中以邻菲咯咐浓 度为1刀g/kg时最低,比对照组氨氮浓度下降SO.27%,(p<0刀5)。真蛋白浓度以邻菲咯 淋浓度为 1刀叭g时最高,为 1.7053 mg/100ml,比对照组真蛋白含量提高了 13.40% (p>0刀5)。不同浓度邻菲咯咐之间 MA产量变化不大,但是随着邻菲咯咐浓度的增加, 丙酸产量显著降低,各试验组CZ/C3分别比对照组增加了35.71%(P<005), 20.110(p>0.05),42.970(p<0.of)。各添加邻菲咯琳组肽氮浓度分别比对照组提高87.88 %、川6刀6%(<00引、川5.15%(p<0刀1〕。 4不同处理方式对小尾寒羊前胃及全消化道代谢的影响 以3只安装永久性瘤胃屡管、十H指肠倭管、回肠屡管的1周岁小尾寒羊阉羊(37.8 上二.45Kg)为试验动物。”通过单因素拉厂方试验研究了基础日粮、甲醛保护豆粕日粮及 添加邻菲咯咐日粮对瘤胃蛋白质代谢及全消化道消化率的影响。结果表明:不同处理组 瘤胃液氨氮含量、真蛋白含量、肽氮含量有差异,但均无显著影响(p>0刀5);与对照组 相比,瘤胃液中TVFA、乙酸、丙酸均未见明显变化,但是添加邻菲咯琳组丁酸含量与 对照组相比下降 26.00%(p<0.of)。各试验组 DM、OM、N的采食量均无显著变化。各 试验组的十二指肠食糜流量比对照组有所增加但是差异不显著(p>0刀5)。甲醛保护组和 邻菲咯咐组十H指肠 DM和 N的流量分别比对照组提高了 17.ZI%(p<0.05)、18.74% (p<0刀引和15.98%(pw.01)、14.88%(p<(刀1)。