【摘 要】
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目的:多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄期女性最常见的生殖与代谢紊乱疾病。miR-199a-3p在PCOS患者卵泡液中表达升高,但其作用机制尚不明确。本文旨在细胞水平研究miR-199a-3p对PCOS样颗粒细胞糖酵解和凋亡的影响,以期在分子水平探讨miR-199a-3p在PCOS发病中的作用机制,为进一步阐述PCOS病因提供新的实验依据。方法:q
【基金项目】
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湖南省卫生健康委员会科研立项课题(NO.20201984);
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目的:多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄期女性最常见的生殖与代谢紊乱疾病。miR-199a-3p在PCOS患者卵泡液中表达升高,但其作用机制尚不明确。本文旨在细胞水平研究miR-199a-3p对PCOS样颗粒细胞糖酵解和凋亡的影响,以期在分子水平探讨miR-199a-3p在PCOS发病中的作用机制,为进一步阐述PCOS病因提供新的实验依据。方法:qRT-PCR检测PCOS患者和正常女性卵泡液中miR-199a-3p表达情况;体外培养KGN细胞株,睾酮干预构建PCOS颗粒细胞模型,qRT-PCR检测PCOS颗粒细胞miR-199a-3p的表达;ELISA测定睾酮干预后颗粒细胞糖酵解代谢产物;生物信息学分析验证miR-199a-3p与LDHA潜在的靶向关系。转染miR-199a-3p抑制剂及类似物后,qRT-PCR检测miR-199a-3p、LDHA、增殖凋亡相关基因表达情况;CCK8测定细胞活力,流式细胞技术测定细胞凋亡情况。结果:1.qRT-PCR检测发现PCOS患者卵泡液中miR-199a-3p表达较正常妇女明显升高。2.KGN细胞中存在miR-199a-3p表达,且睾酮干预KGN细胞后miR-199a-3p表达升高。3.睾酮促进丙酮酸生成,抑制乳酸生成。4.生物信息学分析显示miR-199a-3p可以与LDHA靶向结合。5.miR-199a-3p使丙酮酸生成增加、乳酸生成减少,LDHA表达减少。6.miR-199a-3p使颗粒细胞活性降低、凋亡升高。结论:miR-199a-3p可促进PCOS颗粒细胞凋亡,其机制可能与抑制颗粒细胞糖酵解通路中LDHA表达进而影响颗粒细胞能量代谢相关。
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