液相色谱质谱联用使用多孔石墨碳柱与甲苯流动相分离分析食用油中的甘油三酯

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食用油中甘油三酯类化合物的相似性和多样性使得对其进行分离分析成为一项极具挑战的任务。本文提出多孔石墨化碳柱(PGC柱)与甲苯流动相的分离体系,用液相色谱-大气压化学电离质谱(LC-APCI/MS)技术对食用油中的甘油三酯组分进行了有效的分离、识别和定量。结合不同食用油中甘油三酯组成差异的研究,可为食用油的识别提供一种快速高效的新方法。主要分为以下两部分:(1)以多孔石墨碳柱(150 mm×2.1 mm,5μm)与甲苯-异丙醇-甲酸流动相,建立了一种快速有效的分离分析食用油中甘油三酯组分的LC-APCI/MS新方法。在系统考察实验条件对甘油三酯组分分离与保留的影响后,选择甲苯-异丙醇(各加入0.1%的甲酸)在30分钟内由50:50变化到80:20梯度流动相,柱温35℃,流速0.3 mL/min,样品浓度为0.08mg/mL,进样体积为10μL。APCI-MS使用正离子模式。甘油三酯在该实验条件下的保留显示出一种特殊的规律:按照S-ECN从小到大依次出峰,其中S-ECN(特别定义的碳当量数)=2CN(碳原子数)-3DB(双键数)-5uFA(不饱和脂肪酸数)。使用该方法分离了6种植物油中的甘油三酯。从玉米油、橄榄油、葵花籽油、大豆油、芝麻油和花生油中分别识别出27、21、22、28、25、31种甘油三酯。实验显示,该法可以快速、高效和可重现地分离识别食用油中的甘油三酯,且柱耐用性好。(2)将上述基于PGC的LC-APCI/MS方法进一步用于分离分析16种食用油中的甘油三酯组成,包括12种植物油和4种动物油。除第1部分已经分析的6种植物油以外,还从长柄扁桃油、芥花籽油、葡萄籽油、小麦胚芽油、菜籽油、稻米油分别检测出14、23、18、22、23、26种甘油三酯。比较分析了猪油、鸡油、羊油、黄油4种动物油中甘油三酯组成上的异同。以猪油和鸡油中甘油三酯的分析色谱图为例,研究了本方法对部分甘油三酯的sn-2与sn-1,3位置异构体的分离能力。参考文献方法,结合使用相似替代甘油三酯标准品的标准曲线,检测、识别和计算了LLnLn、LLLn、LLL、OLL、OOL、OLLn、PLL、OOO、POL、OPL、POO、SLL、SOL、BOL、SPO,15种甘油三酯分别在玉米油、大豆油、花生油、猪油和鸡油中各自的含量。最后,对共计58个油样的甘油三酯分析结果数据使用MetaboNexus软件进行主成分分析(PCA),使用SIMCA-P 14.1对玉米油、大豆油、花生油、葵花籽油、菜籽油进行正交偏最小二乘分析(OPLS-DA),显示出不同食用油样品之间的差别,并识别出玉米油、大豆油和葵花籽油与其他食用油之间的特征甘油三酯,为食用油中的甘油三酯分析及其用于掺假食用油的鉴别提供了新的分析方法。
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