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目的:探讨熊果酸(UA)是否通过调控miRNA-21作用于PTEN/PI3K/AKT通路,从而抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。方法:选择肺癌A549细胞作为研究对象。1.采用不同浓度的UA(0、5、10、20、30、40、50μmol/L)作用于细胞24h,用CCK-8检测IC50值为42μmol/L UA做后续实验。2.用miRNA芯片检测UA诱导前后差异性表达的miRNA,并选取miRNA-21做后续实验。3.细胞分组及转染,转染miRNA-21 inhibitor的为miR-21inhibitor组,转染miRNA-21 mimic的为miR-21 mimic组,转染无关序列的为miR-NC组,空白对照组不转染。4.另取对数生长期A549细胞并分为4组,inhibitor+熊果酸组转染miR-21 inhibitor及加入42μmol/L UA培养,mimic+熊果酸组转染miR-21 mimic及加入42μmol/L UA培养,熊果酸组A549细胞加入42μmol/L UA培养,空白组A549细胞不给予干预。CCK-8法检测A549肺癌细胞及转染miRNA-21 inhibitor、miRNA-21 mimic后细胞在UA作用下的增殖率。5.Transwell及划痕实验检测各处理组细胞的迁移和侵袭能力。6.PCR法检测UA作用下及转染miRNA-21 inhibitor、miRNA-21 mimic后细胞中miRNA-21及靶基因第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)、磷脂酰肌醇三激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)的mRNA的表达量。7.Western blotting法检测下调及上调miRNA-21后在UA作用下PTEN、PI3K、AKT蛋白的相对表达水平。结果:1.不同浓度的UA(0、5、10、20、30、40、50μmol/L)作用于肺癌A549细胞,随着UA浓度的增加,细胞的增殖率逐渐减低,UA作用于A549细胞24h后,UA的IC50值为42μmol/L。2.miRNA芯片结果显示UA诱导前后A549细胞中有34条表达改变大于2倍的miRNA(上调的20条,下调的14条),结合检出miRNA信号值及改变倍数综合考虑筛选miRNA21做后续实验。3.miR-21 inhibitor组、miR-21 mimic组、miR-NC组及空白组miRNA-21相对表达量分别为0.35±0.07、2.18±0.12、1.04±0.07、0.96±0.10,miR-21inhibitor组、miR-21 mimic组分别与miR-NC组、空白组比较,P均<0.05,证明转染成功。4.inhibitor+熊果酸组细胞增殖率、24 h划痕相对宽度、穿膜个数分别为43.33%±8.51%、0.876±0.099、(28.400±7.403)个/HP,mimic+熊果酸组分别为66.85%±5.10%、0.445±0.032、(81.400±11.415)个/HP,熊果酸组分别为53.49%±9.72%、0.629±0.051、(42.000±7.348)个/HP,空白组分别为100.00%±12.31%、0.199±0.038、(129.400±5.030)个/HP,熊果酸组与其余3组比较,P均<0.05;5.Inhibitor+熊果酸组PTEN蛋白、PTEN mRNA、API3K蛋白、API3K mRNA、AKT蛋白、AKT mRNA分别为0.78±0.12、2.9±0.06、0.24±0.08、0.29±0.16、0.17±0.07、0.16±0.16,mimic+熊果酸组分别为0.21±0.12、0.94±0.05、0.82±0.11、1.21±0.04、0.74±0.08、0.87±0.02,熊果酸组分别为0.47±0.09、1.53±0.09、0.50±0.05、0.72±0.09、0.48±0.08、0.48±0.12,空白组分别为0.2±0.11、0.96±0.13、0.76±0.07、1.09±0.05、0.74±0.07、1.03±0.1,熊果酸组与其余3组比较,P均<0.05。结论:1.UA能明显抑制肺癌A549细胞的增殖且随着UA浓度的增加,细胞的增殖抑制率逐渐增加。2.UA能明显抑制肺癌A549细胞的迁移和侵袭。3.UA可能通过下调miRNA-21的表达作用于PTEN/PI3K/AKT通路从而抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭。