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为了解猪源链球菌病在冀东(秦皇岛、唐山)地区的血清群分布及流行规律,分别从不同地区235个猪场送检的280份疑似病例中采集病料,经接种含血清改良马丁培养基增菌培养后,用国际通用的标准兰氏链球菌诊断试剂对48株分离菌株进行了血清分群,再结合临床病例资料统计分析及流行病学调查,结果表明,猪链球菌病在冀东地区一年四季均可发生,但以寒冷季节(10月份至次年4月份)多发(233/280,占全年发病数的83.2%)。发病率为15.2%～81%,死亡率为8.1%～50.4%。败血型和脑膜炎型主要发生于35～140日龄猪,但脑膜炎型以哺乳仔猪和断奶仔猪多发。实验室检验中,猪链球菌检出率一般为68.6%(192/280),分离率为40.6%。血清群以兰氏D群为主(占47.9%),其次为C群(38.5%)。明确了猪链球菌病在冀东地区的流行规律、血清群分布及其危害。 从48株分离株中,选择具有一定区域及特定致病类型的12株代表菌株,进行了较为系统的病原学分析及生物学特性鉴定,结果表明分离菌株中C群以马链球菌兽瘟亚种为主,而D群中鉴定出粪链球菌和牛链球菌。分离菌株均具有一定的溶血性,其中属于D群的菌株全部为α溶血,而C群则为B溶血。含2%犊牛血清的改良马丁肉汤更适合于链球菌生长。致病性试验表明供试分离菌株能使小白鼠、家兔和猪感染发病并导致死亡。分离株CL7对小鼠的MLD为5×10~8CFU,CL2菌株的MLD为1×10~9CFU,LN2的MLD为1×10~8CFU。供试菌对头孢唑啉、环丙沙星、恩诺沙星、青霉素、阿莫西林较敏感,高敏率分别为100%、100%、91.7%、91.7%、83.3%,而对链霉素、庆大霉素则100%耐药。 选取分属于C、D 2个主要流行血清群的2株毒力强、免疫原性好的菌株LN2、CL2作为疫苗株,研制了猪链球菌病氢氧化铝二价灭活疫苗。该疫苗对小鼠、断奶仔猪、育肥猪安全性好,无不良反应,小鼠效力试验证实,该疫苗保护率为100%,确定猪最小免疫量为4×10~9CFU。免疫检测结果显示该苗在免疫后21天抗体效价升至高峰,平均AGP效价为1∶41.6。抗体效价与免疫保护相关试验结果表明临界保护值为1∶16(AGP),田间应用保护率为98.5%。