前言:　　 子宫颈癌是妇科常见恶性肿瘤之一。据世界范围内统计,每年约有46.6万左右的新发病例,占所有癌症新发病例的5%,其中80%发生在发展中国家。我国估计为10万,约占全世界1/4,并呈年轻化及上升趋势。人类乳头瘤病毒(HPV)感染是导致宫颈癌发生的主要原因。目前筛查仍然是控制和预防宫颈癌的主要手段。因为通过筛查可以做到早诊和早治,降低宫颈浸润癌的发病率和死亡率。宫颈癌筛查的方法多采用宫颈液基细胞学检查及人乳头瘤病毒(HPV)检测。值得提出的是,对于年轻女性来说,轻度细胞学异常很常见,且大多数会自然转归。由于HPV感染可能只是短暂的,有可能自然转阴,因此HPV检测存在一定的不确定性。人类3号染色体长臂2区6带包含编码端粒酶RNA亚单位的hTERC基因,可以维持细胞分裂过程中端粒的长度。近年来的研究表明,当hTERC过表达时,可能导致肿瘤的发生。原癌基因c-myc定位于人染色体8q24,c-myc基因不但参与细胞的重要功能活动——增殖,分化与凋亡,而且涉及人类肿瘤的形成和演进。有研究表明c-myc基因对静息期细胞转入分裂周期有重要作用。本研究采用间期荧光原位杂交(FISH)技术检测宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌患者宫颈脱落细胞hTERC基因和c-myc基因的扩增情况,分析其与HPV感染及宫颈病变的关系,以探讨它们在宫颈病变筛查中的意义。　　 实验方法:　　 一、标本收集　　 收集2010年10月-2011年9月期间在中国医科大学附属盛京医院妇产科门诊就诊的417例患者的TCT检查剩余标本,患者年龄19-75岁,平均39岁。所有病例均未接受任何治疗。另收集正常者TCT剩余标本20例用于计算阈值。20例正常宫颈脱落细胞取自常规体检妇女,临床检查无异常,TCT检查阴性。对417例就诊者中TCT检查结果为ASCUS及以上病变的患者建议行阴道镜下活检。　　 二、hTERC基因及c-myc基因的检测　　 应用荧光原位杂交(FISH)技术检测417例入组病例及20例正常病例宫颈脱落细胞中hTERC基因及c-myc基因的的表达情况。　　 三、HPV病毒的检测　　 采用SPR-HPV基因分型检测试剂盒检测417例入组病例宫颈脱落细胞中HPV的感染情况。该试剂盒应用表面等离子谐振技术(SPR)检测24种人乳头瘤病毒基因型,包括16种高危型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、81)和8种低危型(6、11、40、42、43、44、54、70)。同一病例中任意一种HPV亚型的感染即视为HPV感染,同一病例中两种及两种以上HPV亚型感染即视为该病例的HPV合并感染。由于高危型HPV16与宫颈癌发生密切相关,所以本研究所说高危型HPV指的是HPV16。　　 实验结果:　　 一、不同宫颈病变组织学类型中HPV感染情况　　 与慢性宫颈炎组比较,CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ/原位癌组、宫颈浸润癌组HPV总体感染差异有统计学意义(P＜0.01),HPV16单独感染差异有统计学意义(P＜0.01),HPV合并感染差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 与CINⅠ组比较,CINⅡ组、CINⅢ/原位癌组、宫颈浸润癌组HPV16单独感染差异有统计学意义(P＜0.01)。宫颈浸润癌组的HPV合并感染差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 与CINⅡ组比较,CINⅢ/原位癌组、宫颈浸润癌组HPV16单独感染差异有统-计学意义(P＜0.01)。宫颈浸润癌组与的HPV合并感染差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 二、不同年龄分组中HPV感染情况　　 与19-29岁年龄组比较,40-49岁组、50-59岁组HPV总体感染差异有统计学意义(P＜0.05)。　　 与30-39岁年龄组比较,50-59岁组HPV总体感染差异有统计学意义(P＜0.05)。　　 与50-59岁年龄组比较,60-75岁组HPV总体感染差异有统计学意义(P＜0.05)。　　 三、不同宫颈组织学类型中hTERC基因及c-myc基因扩增情况　　 与慢性宫颈炎组比较,CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ/原位癌组、宫颈浸润癌组hTERC基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。c-myc基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 与CINⅠ组比较,CINⅡ组、CINⅢ/原位癌组、宫颈浸润癌组hTERC基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。c-myc基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 与CINⅡ组比较,CINⅢ/原位癌组c-myc基因扩增差异有统计学意义(P＜0.05)。　　 与CINⅢ/原位癌组比较,宫颈浸润癌组hTERC基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 四、hTERC基因及c-myc基因扩增与HPV感染情况　　 与慢性宫颈炎症}]PV阳性组比较,CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ/原位癌组、宫颈浸润癌组hTERC基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。c-myc基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 与CINⅠHPV阳性组比较,CINⅡ组、CINⅢ/原位癌组、宫颈浸润癌组hTERC基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。c-myc基因扩增差异有统计学意义(P＜0.01)。　　 五、hTERC基因与c-myc基因扩增的相关性　　 hTERC基因与c-myc基因的扩增情况有统计学意义,hTERC基因的阳性检测率比c-myc基因的阳性检测率高,且在置信度(双侧)为0.01时两者有显著相关性。　　 结论:　　 c-myc基因与hTERC基因扩增与宫颈细胞组织学异常及HPV感染密切相关,随着病变程度增加其扩增阳性率增加,且c-myc基因与hTERC基因扩增具有显著相关性,c-myc基因与hTERC基因扩增的单独及联合检测可作为预测宫颈癌前病变进展的生物遗传学标志物。　　 不同程度病变组间高危型HPV(本研究指的是HPV16)感染率比较差异有统计学意义,证明了HPV感染与宫颈癌及CIN的发生密切相关。从CINⅠ、CINⅡ、到CINⅢ,不同亚型HPV合并感染率不断增高,14例宫颈癌中有7例为HPV不同亚型的合并感染,提示HPV合并感染可能增加或促进了宫颈病变恶化的趋势。