微囊藻毒素-LR阻抗型免疫电化学检测方法的研究

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:king0083
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
微囊藻毒素-LR(MC-LR)是淡水水体中最普遍且毒性最强的一类蓝藻毒素。目前,藻毒素检测方法多需昂贵仪器且操作繁杂,无法满足快速检测的要求。因此,研究和建立一种快速,灵敏,简便的检测方法具有重要意义。本文以合成MC-LR完全抗原,制备特异性多克隆抗体为基础,并结合免疫传感技术和纳米材料自组装法等,构建电化学阻抗型免疫传感检测方法,主要研究内容如下:采用“活泼酯法”和“碳二亚胺法”合成MC-LR免疫抗原及检测抗原。免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,纯化后其效价高于5.2×104。通过间接竞争ELISA法作出MC-LR竞争标准曲线,线性范围为0.25~4μg/L;半数抑制率IC50为0.68μg/L。除与MC-RR的交叉反应率约为21.9%外,与MC-LW,MC-LF的交叉反应率均小于1.0%。基于L-半胱氨酸(L-Cys)和纳米金(Nano-Au)固定抗体技术建立了MC-LR无标记型免疫传感检测方法。对MC-LR的阻抗响应线性范围为0.05~300 ng/mL;最低检出限为1.82×10-2 ng/mL(S/N=3);检测时间仅为15 min;对饮用水源水平均加标回收率在96.8%~112.5%之间;对修饰电极循环扫描42圈后,峰电流无显著变化,变异系数为3.58%;4℃下保存30天稳定性良好。基于1,6-己二硫醇(HDT)自组装技术和纳米金吸附作用相结合的方法固定微囊藻毒素抗体构建免疫传感器。结果表明,阻抗响应线性范围为0.25~95 ng/mL,检出限达8.5×10-2 ng/mL(S/N=3);电极的重现性及稳定性较好,对同一浓度连续测定8次,相对标准偏差为7.84%;4℃下储存30天后阻抗响应信号无明显变化;应用于饮用水,样品的平均加标回收率为92.6%~118.3%;检测时间为15 min。基于多壁碳纳米管(MWNTs)/室温离子液体(RTILs)修饰电极固定抗体,构建了MC-LR免疫传感检测方法。本法具更高的灵敏度,最低检出限为1.7×10-3 ng/mL(S/N=3),在5×10-3~1×102 ng/mL范围内成良好的线性相关;对饮用水平均加标回收率为80.95%~127.23%;水中常见的离子对于MC-LR的测定均无明显干扰。首次提出电极保护液的设计构想。基于室温离子液体的优良特性,在4℃下,对修饰电极的稳定性进行了长达60天的考察,筛选出了具有有利于抗体蛋白维持其稳定性的离子液体及其最佳浓度。利用圆二色谱法初步探究了RTILs维持抗体蛋白的稳定性的机理,揭示了抗体蛋白在RTILs中的构象变化。本研究所建立的检测饮用水中MC-LR的阻抗型电化学免疫传感检测方法,灵敏、快速、方便,具有良好的发展前景,为实现直接、实时、原位、在线的MC-LR日常监测工作提供了重要的实验依据。
其他文献
随着矿井通风系统的发展,以及国内外学者对于此领域的研究和我国相关法律法规的逐渐完善,我国的煤矿安全在向着利于保证生产和人员生命财产安全的方向发展。瓦斯作为煤矿安全
一、前言 A55卧式加工中心是德国生产的一种机床,其主轴精度要求很高:较高的转速,较小的尺寸、形位误差,较高的轴承精度以及良好的润滑系统。这样A55加工出来的零件精度才比较高,
随着互联网经济的不断发展,消费者的消费行为尤其是节日期间的消费行为呈现出许多新特点,对价格监管工作提出了新挑战。为紧跟时代新发展,把握消费形式新转变,大连市物价局价
研究目的1、青少年是伤害发生的高危人群,且青少年期伤害已纳入我国疾病控制工作的范畴。探讨青少年行为与伤害这两项与青少年健康密切相关的公共卫生问题之间的关系,开展青
目的:1.体内实验探讨十溴联苯醚(brominated diphenyl ethers-209, BDE-209)对小鼠卵巢储备功能的影响;2.采用机械分离,胰蛋白酶消化与低速离心相结合的方法分离培养小鼠卵巢颗
司法人员渎职犯罪作为渎职犯罪中的一类,有其区分于其他渎职犯罪的特性。对于司法的概念,应当采取三权理论,即包括了侦查、检察、审判、监管以及执行行为。明确了司法人员渎
对瓶颈TSP问题给出了一种融合局部搜索机制和MAX-MIN策略的蚂蚁优化算法,在通用微机上求解了一系列实例问题,获得了满意的效果.
C7632液压半自动多刀车床是机械行业拥有量较多的一种半自动机床。它采用二极管矩阵顺控装置及继电器逻辑控制系统,液压驱动上下刀架作纵横两个方向的运动,装有液压卡盘。其加
随着互联网信息技术的不断深入发展,'数字校园'、'智慧校园'等概念也一一涌现,当前的各大民航学院越发重视内部的信息化建设。但由于信息手段并未构建成熟,
切换时延是终端移动的关键之一.业界已提出多种策略,但需要修改移动IP协议栈.基于MBG的移动IP路由优化策略在预知网络结构的前提下,能有效缩短切换时的通信中断时延.文章最后