【摘 要】
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谷子去皮后称小米,小米的营养成分丰富,包括碳水化合物、氨基酸和蛋白质、维生素、脂肪酸、矿物质等,这些营养元素所占比例均衡,而且容易被消化,是一种良好的营养来源。叶酸是生命体必须的一种营养元素,在细胞中的代谢十分丰富,参与细胞的分裂生长以及核酸、氨基酸、蛋白质等的合成。本实验通过两年的大田实验,对来自中国不同生态区的共60个谷子品种进行分析,通过液质联用(LC-MS)的方法,测定60个谷子品种中叶酸
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谷子去皮后称小米,小米的营养成分丰富,包括碳水化合物、氨基酸和蛋白质、维生素、脂肪酸、矿物质等,这些营养元素所占比例均衡,而且容易被消化,是一种良好的营养来源。叶酸是生命体必须的一种营养元素,在细胞中的代谢十分丰富,参与细胞的分裂生长以及核酸、氨基酸、蛋白质等的合成。本实验通过两年的大田实验,对来自中国不同生态区的共60个谷子品种进行分析,通过液质联用(LC-MS)的方法,测定60个谷子品种中叶酸的含量,初步筛选出60个谷子品种中叶酸含量最高和含量最低的品种,并对其进行杂交,构建F2代分离群体。对10份样品进行RNA的提取以及转录组的测序,运用生物信息学分析的方法,挖掘筛选出与叶酸含量相关的差异表达基因,并进行验证,从而开发与叶酸合成相关的分子标记。主要研究结果如下:(1)从60个品种的谷子中提取出叶酸,运用LC-MS的方法,检测出群体中叶酸含量最高的品种和含量最低的品种分别为:朝新208和油谷。建立了谷子叶酸检测的质谱条件:电喷雾正离子电离ESI,锥孔电压:4000V;分辨率:0.7;母离子m/z 442.1;定量子离子m/z 295.1;定性子离子m/z 176.3;碰撞能:19.52eV。(2)将未喷施和喷施有机硒肥的谷子叶酸含量进行比较,发现喷施硒肥的谷子叶酸含量均低于未喷施硒肥的品种,其作用机理有待进一步研究。(3)通过分析转录组测序结果,初步筛选出与谷子叶酸合成代谢相关基因序列23个,再根据基因表达量差异以及基因功能注释,最终锁定可能与叶酸合成代谢有关的基因6个,GO分析结果注释表明,这些基因可能参与辅酶氨基酸的转运以及叶酸的代谢转运过程。(4)对筛选出的6个差异表达基因进行qRT-PCR分析,发现2个基因与叶酸含量相关:基因Seita.2G307800促进谷子叶酸合成,基因Seita.4G012900抑制叶酸合成或者促进叶酸降解。
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