不同授粉的度尾文旦柚裂果相关差异蛋白的研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 10次 | 上传用户:xxn1954
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度尾文旦柚是福建省仙游县特有的名贵果品,果实品质优良,但裂果问题严重。其具有自交不亲和性和很强的单性结实能力,经琯溪蜜柚异花授粉处理后,种子数明显增多,但能够有效地减少其裂果率。因此,探究琯溪蜜柚异花授粉能克服裂果的分子机理,对于提高度尾文旦柚的果实品质和经济效益,具有重要的理论和实践意义。本研究以度尾文旦柚为试验材料,运用蛋白质组学方法对琯溪蜜柚授粉不裂果和自交裂果的子房和果皮蛋白质进行比较研究。主要研究结果概括如下:1.样品制备是影响检测蛋白质种类多少和双向电泳图谱质量的一个重要因素,本文比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)和裂解液直接提取两种方法对文旦柚果皮蛋白质的提取效果,结果表明:TCA法不能有效地提取果皮蛋白质,裂解液直接提取法得到的图谱背景干净,蛋白质点清晰,说明裂解液直接提取法适用于文旦柚果皮蛋白质的提取。2.通过比较分析琯溪蜜柚授粉不裂果和自花授粉裂果果皮的蛋白质图谱,共找出13个差异蛋白。其中有4个蛋白质呈上调表达,9个蛋白质呈下调表达。差异蛋白经胶内酶解和MALDI-TOF-TOF / MS分析,获得的PMF通过数据库检索,鉴定了10个蛋白质。在鉴定出的10个差异蛋白质中,其中两个为未知蛋白质。其他蛋白质分别为胞液谷氨酰胺合成酶,在氮同化过程中起着十分重要的作用;2 ,3-二磷酸甘油酸的磷酸甘油变位酶,与能量代谢有关;S-腺苷同型半胱氨酸水解酶,与细胞内的甲基化反应有关;苹果酸酶,是苹果酸代谢中的关键酶;果糖二磷酸醛缩酶,属于光合作用相关蛋白质;超氧化物歧化酶和过氧化氢酶,与抗氧化作用有关。3.通过分析比较琯溪蜜柚授粉和自花授粉发育早期子房的蛋白质图谱,共找出28个差异蛋白。其中有7个蛋白质呈上调表达,21个蛋白质呈下调表达。差异蛋白质经胶内酶解和MALDI-TOF-TOF / MS分析,获得的PMF通过数据库检索,鉴定成功20个蛋白。在鉴定成功的20个差异蛋白质中,其中五个为未知蛋白质。根据蛋白质的功能,找出可能与裂果有关的蛋白质:钙调素和钙网质蛋白前体与细胞内Ca2+浓度有关,可调节细胞的功能;L-抗坏血酸氧化酶、抗坏血酸过氧化物酶,与抗氧化作用有密切关系;假定的新生多肽相关复合物α多肽,其生物学功能至今还不完全清楚。通过对这些差异蛋白质在裂果过程中的功能分析,认为这些蛋白质在度尾文旦柚裂果过程中的差异表达可能影响了果皮和胚的正常发育,进而导致了裂果。
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