siRNA干扰NgR及联合NT-3对大鼠脊髓损伤修复的影响

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目的:研究siRNA干扰NgR及联合NT-3基因转染的神经干细胞对大鼠脊髓损伤修复的影响。方法:选用SD大鼠108只,雌雄不限,体重200g—250g。完全随机分为假手术组(n=27)、手术对照组(n=27)、NgR-siRNA组(n=27)和NgR-siRNA联合NT-3组(n=27)。按照手术后以下9个时间点12h、Id、2d、3d、5d、7d、14d、21d和28d再分为9小组,每小组3只。制作大鼠脊髓T8水平后侧半横断直接切割模型。自损伤处向头尾两端缓慢注入相应细胞悬液,5min内注射完毕并留针5min,并用生物胶封闭针孔防止细胞悬液顺针道溢出。相应时间点取出横断切口上下各5mm,共10mm脊髓组织。利用QPCR。Wb测定bFGF、NGF、MBP基因及蛋白表达的变化,综合评价siRNA干扰NgR及联合NT-3对大鼠脊髓损伤后修复的影响。对所得数据用均数、标准差进行描述;组内比较采用方差分析,并采用SNK法行两两间比较。结果:1、QPCR基因表达结果示:siRNA干扰NgR联合NT-3组优于siRNA干扰NgR组,而siRNA干扰NgR组优于手术对照组。2、Wb结果示:bFGF表达在术后3周内siRNA干扰NgR联合NT-3组优于假手术组,到第4周bFGF与假手术组无统计区别;NGF表达在术后3天内,各实验组与假手术组无统计差异;1周到3周这段时间,各实验组NGF表达量均高于假手术组,各实验组间无统计学差异;MBP表达量术后第1天到第四周,siRNA干扰NgR联合NT-3组优于siRNA干扰NgR组,而siRNA干扰NgR组优于假手术组。结论:1、siRNA干扰NgR的神经干细胞移植到大鼠损伤脊髓可促进脊髓修复;2、siRNA干扰NgR联合NT-3基因转染的神经干细胞移植到大鼠损伤脊髓可促进脊髓修复,且强于siRNA干扰NgR的神经干细胞移植对损伤脊髓的修复。
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