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类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是最常见和致残率最高的骨关节疾病之一,主要病理环节包括免疫功能失常,关节滑膜细胞聚积与滑膜增厚,关节软骨和骨破坏三个方面。本实验利用国际上研究RA通用的胶原性关节炎(CIA)小鼠模型,以中医理论为指导,采用现代医学先进的技术方法和实验手段,从动物整体模型、关节组织、细胞和分子等不同层面进行系统、深入的研究,探讨中药蜈蚣三七提取物治疗RA的免疫调节机理,为日后大规模应用于临床提供理论依据。 1 蜈蚣三七提取物对CIA小鼠组织病理学及超微结构改变的影响 采用Ⅱ型胶原制作CIA小鼠模型,设立模型组、雷公藤组、蜈蚣三七提取物大、中、小剂量组、正常组及正常给蜈蚣三七提取物组,造模7d后开始灌胃给药,于28d、36d分别处死1/2动物观察各项指标。结果如下。 (1)取小鼠尾、趾关节用10%甲醛溶液固定、EDTA-Na2软化,石蜡包理切片、HE染色,光学显微镜下观察。皮下软组织充血或水肿情况:蜈蚣三七提取物各剂量组、雷公藤组均能减轻关节软组织充血、水肿程度,但以蜈蚣三七提取物小剂量组最为显著。滑膜充血水肿情况:蜈蚣三七提取物各剂量组、雷公藤组均能不同程度的减轻滑膜充血、水肿程度,但以蜈蚣三七提取物小剂量组最为显著。滑膜增生情况:蜈蚣三七提取物各剂量组、雷公藤组均能不同程度的抑制滑膜增生,以蜈蚣三七提取物小剂量组最为显著。滑膜炎性细胞浸润情况:蜈蚣三七提取物各剂量组、雷公藤组均能减少局部炎性细胞的渗出,其中以蜈蚣三七提取物小剂量组最为显著。软骨增生情况:蜈蚣三七提取物各剂量组和雷公藤组均有不同程度的抑制CIA小鼠趾、尾关节部软骨细胞增生的作用,以小剂量组最为显著。 (2)取小鼠尾、趾关节用戊二醛溶液固定、软化作电镜观察。正常给药组:正常滑膜层细胞性内膜由2-3层滑膜细胞组成,滑膜细胞疏松地平行排列,分为3型。A型细胞形似吞噬细胞,胞浆以线粒体为主,含小泡和溶酶体。B型细胞形似成纤维细胞,胞浆内富含粗面内质网,少量空泡和线粒体。AB型细胞,兼有两种细胞的特点。模型组:滑膜层细胞内膜明显增厚,多达5~6层,滑膜细胞增生肥大,排列紊乱。细胞器变形,甚至消失,胞质内充满大量空泡,胞核染色质分布不均。有的细胞因变性、坏死至萎缩,仅见到细胞碎块与大量胶原纤维交